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电场处理柠条种子对干旱胁迫下幼叶基因表达影响的初步研究
作 者: 刘瑶
导 师: 杨体强
学 校: 内蒙古大学
专 业: 生物物理学
关键词: 电场 柠条 转录 mRNA差异显示 干旱胁迫
分类号: S793.3
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
尽管电场处理种子生物效应的研究已有半个多世纪,但是,并没有得到广泛有效的开发利用,其中一个重要原因是电场生物效应机理尚不十分清楚。在电场生物效应的机理研究中,人们已从酶活性变化、核酸、蛋白质代谢、种子超弱发光、酶谱谱带、酶蛋白分子构象与功能关系等不同角度进行了分析。本文在前期电场对植物种子抗旱性影响的研究基础上,从植物转录水平,寻求电场处理植物种子宏观生物效应的微观机制。以柠条锦鸡儿种子为材料,利用mRNA差异显示技术,测定柠条种子经电场处理后在干旱胁迫下其幼叶转录水平的表达变化。实验结果显示,电场处理组相对于自然对照组发生变化的差异条带数为503条,电场处理组相对于胁迫对照组发生变化的差异条带有493条。研究结果表明:电场处理对柠条幼叶基因表达产生影响,这为电场处理植物种子技术的应用及进一步明确电场生物效应原发机制提供了理论和实验依据。
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全文目录
摘要 5-6 ABSTRACT 6-10 缩略词表 10-11 第一章 前言 11-18 1.1 电场对植物影响研究现状 11-14 1.1.1 电场对植物影响的国内外研究进展 11-12 1.1.2 电场对植物作用机理的认识 12-14 1.2 mRNA差异显示技术 14-17 1.2.1 mRNA差异显示技术原理 14-15 1.2.2 mRNA差异显示技术优点和不足 15 1.2.4 mRNA差异显示技术在植物基因研究中的应用 15-17 1.3 实验目的与意义 17-18 第二章 材料、仪器与方法 18-28 2.1 实验材料 18-22 2.1.1 实验材料 18-19 2.1.2 引物 19 2.1.3 实验试剂 19-22 2.2 实验主要仪器设备 22-23 2.3 实验方法 23-28 2.3.1 柠条幼叶的RNA提取 23-24 2.3.2 逆转录合成cDNA第一链 24-25 2.3.3 以cDNA第一链为模板的第二链的合成与扩增 25-26 2.3.4 变性聚丙烯酰胺电泳及银染 26-27 2.3.5 筛选差异条带 27-28 第三章 结果与分析 28-47 3.1 柠条幼叶总RNA的提取 28 3.2 逆转录结果的检验 28-29 3.3 mRNA差异显示分析 29-47 3.3.1 PCR扩增可重复性检验 29-30 3.3.2 mRNA差异显示结果分析 30-47 第四章 讨论 47-50 4.1 柠条幼叶RNA提取 47-48 4.2 对mRNA差异显示结果的分析 48-49 4.3 结论 49 4.4 后续工作思路 49-50 参考文献 50-54 致谢 54
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中图分类: > 农业科学 > 林业 > 森林树种 > 阔叶灌木 > 柠条(中间锦鸡儿)
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