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艾灸肾俞穴对衰老大鼠肾脏细胞外基质代谢调控的影响

作　者: 李妙善
导　师: 孙国杰
学　校: 湖北中医学院
专　业: 针灸推拿学
关键词: 衰老 艾灸疗法 肾脏 基质金属蛋白酶 转化生长因子 细胞外基质
分类号: R245
类　型: 博士论文
年　份: 2007年
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内容摘要


目的：从细胞外基质降解调节机制的角度出发，观察基质金属蛋白酶及其抑制剂、转化生长因子在大鼠肾组织中随衰老表达的变化，以探讨细胞外基质降解调节机制在肾脏衰老过程中所起的作用，和艾灸肾俞穴对延缓肾脏衰老的影响机制。方法：以自然初老龄大鼠为衰老模型，设以青年组(3月龄)、老年组及老年艾灸组(17月龄)；青年组和老年组同步喂养，不予其他处理；老年艾灸组则用直径约0.8cm的艾条，于“肾俞”穴上方2～3cm处悬灸，每日1次，每次每穴10min，5日为1疗程，共8个疗程；运用免疫组化方法观察各组大鼠肾脏组织形态学变化、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2、TGF-β的蛋白表达。结果：(1)老年组正常肾小球与青年组相比，数量减少，硬化肾小球比例显著增加(P＜0.01)；肾小体和毛细血管襻的面积、直径、周长与青年组相比均有明显增大，呈显著性差异(P＜0.01)；集合管的面积、周长、外径、内径及管腔面积与青年组相比均有不同程度的缩小(P＜0.01或P＜0.05)。艾灸组与老年组比较，正常肾小球数量明显增加，硬化肾小球比例明显降低(P＜0.05)；肾小球和毛细血管襻的面积、直径、周长与老年组相比有着不同程度的降低(P＜0.01或P＜0.05)；集合管的面积、周长、外径、内径及管腔面积与老年组相比明显增粗(P＜0.05)。(2)老年组大鼠肾组织TIMP-1、TIMP-2的阳性表达与青年组相比显著增加，呈显著性差异(P＜0.01)；艾灸组大鼠肾组织TIMP-1、TIMP-2在肾小球及小管间质的阳性百分比与老年组比较，也呈显著性差异(P＜0.01)。青年组、老年组、艾灸组，三组大鼠肾组织MMP-2、MMP-9在肾小球及小管间质的阳性百分比无显著性差异(P＞0.05)。(3)老年组大鼠肾组织TGF-β1的阳性表达与青年组相比显著增加，呈显著性差异(P＜0.01)；艾灸组大鼠肾组织TGF-β1在肾小球及小管间质的阳性百分比与老年组比较，也呈显著性差异(P＜0.01)。结论：肾脏衰老某些细胞因子如TGF-β等上调，引起了TIMP-1、TIMP-2的表达增多，高表达的TIMP-1、TIMP-2抑制了MMP-9和MMP-2的蛋白水解活性，从而推动ECM的合成降解平衡向着降解减少的失衡发展，最终导致了肾小球硬化和小管间质纤维化的形成。艾灸肾俞穴可通过下调TGF-β1，抑制TIMP-1、TIMP-2的表达，相应调节MMP-9／TIMP-1、MMP-2／TIMP-2的比值，进而调控ECM的合成和积聚，影响肾脏的硬化和纤维化，并延缓大鼠肾组织结构衰老及肾功能减退。

全文目录


中文摘要  6-8
Abstract  8-9
英文缩略词对照表  9-10
前言  10-11
实验一 艾灸肾俞穴对老化肾脏组织的组织形态学影响  11-18
  1 材料与方法  11-12
    1.1 实验动物与分组  11
    1.2 处理方法  11
    1.3 观察方法  11-12
    1.4 统计学处理  12
  2 结果  12-14
    2.1 光镜观察  12
    2.2 图像分析结果  12-14
  3 讨论  14-16
    3.1 衰老模型的选择  14-16
    3.2 衰老大鼠肾脏组织的随增龄变化  16
  参考文献  16-18
实验二 艾灸肾俞穴对衰老大鼠肾组织明胶酶及其抑制物的影响  18-30
  1 材料与方法  18-20
    1.1 实验动物与分组  18
    1.2 实验主要试剂  18-19
    1.3 实验主要仪器  19
    1.4 处理方法  19
    1.5 免疫组化染色  19-20
    1.6 数据统计分析  20
  2 结果  20-23
    2.1 老年大鼠肾组织标本PAS染色结果  20
    2.2 大鼠肾组织TIMP-2免疫组化染色结果  20-21
    2.3 大鼠肾组织MMP-2免疫组化染色结果  21-22
    2.4 大鼠肾组织TIMP-1免疫组化染色结果  22
    2.5 大鼠肾组织MMP-9免疫组化染色结果  22-23
  3 讨论  23-26
  参考文献  26-30
实验三 艾灸肾俞穴对衰老大鼠肾组织转化生长因子的影响  30-35
  1 材料与方法  30-32
    1.1 实验动物与分组  30
    1.2 实验主要试剂  30
    1.3 实验主要仪器  30
    1.4 处理方法  30-31
    1.5 免疫组化染色  31
    1.6 数据统计分析  31-32
  2 结果  32-33
  3 讨论  33-34
  参考文献  34-35
结论与讨论  35-47
  一、关于对"肾"本质研究及肾脏衰老的认识  35-38
  二、关于衰老肾脏病变的中医认识  38-42
  三、艾灸的治疗作用及取穴依据  42-43
  四、本课题的结论与讨论  43-44
  五、本课题的创新点  44
  参考文献  44-47
综述一 基质金属蛋白酶及其抑制因子与肾脏疾病  47-52
  参考文献  50-52
综述二 艾灸的治疗作用和机理研究进展  52-56
  参考文献  54-56
致谢  56

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中医临床学 > 针灸学、针灸疗法
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