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芩丹胶囊对自发性高血压大鼠血管外膜Ⅰ、Ⅲ胶原表达的影响

作　者: 郭雪峰
导　师: 张继东
学　校: 山东大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 芩丹胶囊 高血压 自发性高血压大鼠 外膜重构 Ⅰ、Ⅲ胶原
分类号: R259
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的1.观察芩丹胶囊对自发性高血压大鼠血压的影响。2.观察芩丹胶囊对血管外膜Ⅰ、Ⅲ胶原表达的影响,并探讨芩丹胶囊逆转高血压血管外膜重构的机制。方法1.研究对象：32只40周龄雄性SHR大鼠随机分为4组,模型组(SHR组)、芩丹胶囊大剂量组(SHR+QDH组)、芩丹胶囊小剂量组(SHR+QDL组)、氯沙坦组(SHR+Los组),另设40周龄雄性WKY大鼠16只分为空白对照组(WKY空白组)及正常药物对照组(WKY+QD组)。SHR+QDH组给予芩丹胶囊750mg/(kg·d)；SHR+QDL组给予芩丹胶囊150mg/(kg·d)；SHR+Los组给予氯沙坦30mg/(kg·d)；WKY+QD组给予芩丹胶囊750mg/(kg·d)；WKY空白组和SHR组给予相等剂量生理盐水,1次/d,连续给药12周。各组大鼠在末次给药后禁食24 h,不禁水。10%水合氯醛腹腔注射麻醉后进行后续实验。2.研究内容：(1)大鼠尾动脉收缩压测定。(2)免疫组化法观察胸主动脉外膜ⅠⅢ胶原表达。(3)实时定量PCR检测胸主动脉外膜Ⅰ、Ⅲ胶原表达。(4)用western blotting检测Ⅰ胶原蛋白表达。结果1.各组大鼠治疗前后收缩压比较见图1,从给药第4周起,SHR+QDH组、SHR+QDL组、SHR+Los组分别与SHR组比较,血压下降明显,其差异均具有统计学意义(P<0.05)。给药6周到12周间,SHR+QDH组比SHR+QDL组血压下降更为显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.胸主动脉组织免疫组织化学测定结果显示,见表2,图2、3,SHR组与WKY空白组比较,Ⅰ、Ⅲ胶原表达明显增多,差异具有统计学意义(P<0.05)；SHR+QDH组、SHR+QDL组及SHR+Los组表达较SHR组均减少(P<0.05)。WKY空白组与WKY+QD组Ⅰ、Ⅲ胶原表达量比较,其差异无统计学意义(P>0.05),SHR+QDH组与SHR+QDL组比较差异有统计学意义(P<0.05),但与SHR+Los组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3.主动脉壁Ⅰ、Ⅲ胶原mRNA表达水平比较采用2-ΔΔCt方法,将Ⅰ、Ⅲ型胶原基因表达Ct值转换为相对于WKY空白组的变化倍数,可以直接得到的目的基因相对于参照基因的定量。如图6和7所示分别为Ⅰ、Ⅲ胶原的扩增、溶解曲线和溶解峰,说明Ⅰ、Ⅲ胶原是特异性基因表达,无引物二聚体及非特异性扩增。研究结果显示：见图4,WKY空白组和WKY+QD组间差异无统计学意义(P>0.05),SHR+QDH组和SHR+QDL组间差异有统计学意义(P<0.05)。SHR组大鼠胸主动脉壁Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达量与WKY组之间的差异有统计学意义(P<0.05)。SHR+QDH组、SHR+QDL组及SHR+Los组大鼠胸主动脉壁Ⅰ、Ⅲ型胶原表达与WKY组大鼠相比明显增多,与SHR组相比有所减少,其差异有统计学意义(P<0.05)。4.Ⅰ胶原在免疫印迹中的蛋白表达WKY空白组,WKY+QD组,SHR+Los组,SHR+QDH组,SHR+QDL组,SHR组蛋白表达依次增强,Ⅰ型胶原分子量大小在120KD左右,参照actin,分子量为43KD,可看出蛋白表达依次增强的趋势。见图5,用Ⅰ型胶原与actin的比值做统计分析结果显示：WKY空白组和WKY+QD组间差异无统计学意义(P>0.05),SHR+QDH组和SHR+QDL组间差异有统计学意义(P<0.05)。SHR模型组和正常WKY相比,差异有统计学意义(P<0.05)；SHR+QDH组.SHR+QDL组.SHR+Los组分别与SHR组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)；SHR+QDH组与SHR+Los组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论芩丹胶囊对SHR大鼠有显著的降压疗效,其降压机制与芩丹胶囊降低SHR大鼠Ⅰ、Ⅲ胶原表达水平有关,同时与逆转血管外膜重构,抑制外膜纤维化,减少Ⅰ、Ⅲ胶原在外膜的合成与沉积有关。

全文目录


中文摘要  6-9
ABSTRACT  9-12
符号说明  12-13
前言  13-15
材料和方法  15-22
结果  22-24
讨论  24-37
结论  37-38
附图表  38-43
参考文献  43-49
致谢  49-50
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录  50-51
学位论文评阅及答辩情况表  51

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