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酒精对兔骨髓间充质干细胞神经递质表达的影响

作　者: 张振
导　师: 王义生
学　校: 郑州大学
专　业: 骨外科
关键词: 酒精神经递质骨坏死骨髓间充质干细胞骨化
分类号: R681.8
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

背景与目的：近年来,饮酒已经成为日常生活中不可缺少的活动,因酒精中毒导致的股骨头坏死表现出逐年增加的趋势,现已占非创伤性股骨头坏死的首位。但该病的确切发病机制仍未完全清楚。近年来的研究发现,在骨髓中除了造血干细胞之外还存在着一种间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs),其具有多向分化的潜能,在特定的条件下能够分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞及神经细胞等。已有实验证明大剂量的酒精不仅会诱导骨髓间充质干细胞成脂分化,还能够影响骨组织内神经纤维中神经递质的表达,抑制其对组织成骨能力的促进作用,进一步导致机体骨形成及骨愈合能力下降,引起骨和血管组织的损伤及凝血机制的改变,继而发生股骨头的缺血性坏死。目前已有研究发现,酒精能够影响动物骨组织内神经递质在神经纤维中的表达,而本实验则主要通过体外分离培养BMSCs,细胞传代后加入酒精进行干预,采用分子生物学检测方法,观察酒精对BMSCs中多种神经递质表达的影响,从而进一步探讨酒精性股骨头坏死的机制。方法：取兔四肢长骨骨髓,经密度梯度离心和贴壁培养后,获得原代骨髓间充质干细胞。将传代培养的第3代细胞随机分为两组,实验组于培养基中加入0.09mol/L酒精,对照组无特殊处理。分别于酒精诱导后第4,7,11,15天提取RNA,运用RT-PCR及荧光定量PCR技术测定细胞中成纤维细胞生长因子(fibrocyte growth factor,FGF)、降钙素相关基因肽受体(calcitontin gene-related peptide receptor,CGRPR)、血管活性肠肽受体(vasoactive intestinal peptide receptor, VIPR)、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、P物质受体(substance P receptor,SPR)和成脂转录因子过氧化物酶体增殖子活化受体y(peroxisom proliferator-activeted receptor-y,PPARy)的mRNA表达,并在第14天检测培养液中骨钙素(osteocalcin,OCN)的含量和细胞内碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的活性。结果：实验组内FGFmRNA、CGRPRmRNA、VIPRmRNA、NGFmRNA和SPRmRNA表达,以及ALP活性和OCN含量,均较对照组明显降低,而PPARy mRNA的表达较对照组明显增高,差异均具有统计学意义(P<0.01),而实验组在不同时间点间各因子进行比较却无明显差异(P>0.05)。结论：酒精可使骨髓间充质干细胞中具有成骨作用的神经递质或其受体的表达下降,进而抑制成骨的发生,这可能与酒精性股骨头坏死发生的机制有关。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
1. 前言  10-11
2 材料与方法  11-17
  2.1 材料  11-12
  2.2 方法  12-17
3. 结果  17-21
4 讨论  21-28
5 小结  28-29
6 参考文献  29-32
酒精性股骨头坏死与周围神经系统相关性研究  32-51
  1 酒精性股骨头坏死发病机制  33-35
  2 神经系统与骨的相关性研究  35-41
  3 骨髓间充质干细胞研究进展  41-44
  4 展望  44-46
  参考文献  46-51
个人简历和在读期间发表论文情况  51-52
致谢  52

酒精对兔骨髓间充质干细胞神经递质表达的影响

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