|
花锚为龙胆科（Gentianaceae）花锚属（Halenia）一年生植物花锚Halenia corniculata（L.）Cornaz的全草。分布于俄罗斯,蒙古等地,我国,除华南、华东外,其他地区均有分布,主产东北、华北及陕西等地。蒙藏医常用治疗肝炎等“协日”和“热”过盛即中医中所指的湿邪热毒所致疾病,而中医少用。本文对其生药学特征加以概述,并归纳总结了该属植物的化学成分与药理作用。在抗实验性肝损伤活性指导下对花锚的氯仿与正丁醇层萃取物的化学成分进行了系统研究,通过体内外实验探讨了花锚与肝损伤的关系。并对花锚及从中分离得到的大部分化合物进行了抗骨质疏松的体内外药效学研究。通过化学与免疫性肝损伤动物模型,确定了花锚的氯仿与正丁醇层萃取物为抗实验性肝损伤作用的活性部位。以此为指导,利用多种现代化学分离手段,从这两部分中分离得到了22个化合物。通过红外、紫外、质谱核磁等波谱学方法并结合化合物的理化性质鉴定了它们的结构,分别为:1-羟基-2,3,4,5.四甲氧基（口山）酮（1）,1-羟基-2,3,4,7-四甲氧基（口山）酮（2）,1-羟基-2,3,4,5,7-五甲氧基（口山）酮（3）,1-羟基-2,3,5-三甲氧基（口山）酮（4）,1,3-二羟基-4,5-二甲氧基（口山）酮（5）,1-羟基-3,5-二甲氧基（口山）酮（6）,1,8-二羟基-3,5-二甲氧基（口山）酮（7）,1,3-二羟基-4,7-二甲氧基（口山）酮（8）,2,3,5-三甲氧基-1-O-樱草糖氧基（口山）酮（9）,2,3,4,5-四甲氧基-1-O-樱草糖基（口山）酮（10）,2,3,4,7-四甲氧基-1-O-樱草糖基（口山）酮（11）,木犀草素（12）,芹菜素（13）,7-O-葡萄糖基木犀草素（14）,（7S）-7-caffeoyloxysweroside（15）,表段马钱子半缩醛内酯（16）,獐牙菜苷（17）,8-羟基-2-甲基色原酮（18）,1-羟基-2,3,7-三甲氧基（口山）酮（19）,1,3,5-三羟基（口山）酮（20）,乌苏酸（21）,β-谷甾醇（22）。其中化合物18为新的天然产物,未见数据报道,化合物7,15为从龙胆科内首次分离得到,化合物5,6,8,20为从花锚属内首次分离得到,化合物9,16,17,19,21,22为从该种植物内中首次分离得到。对化合物1,2,9,11进行了体内抗CCl4所致小鼠急性肝损伤作用的实验研究。结果显示化合物9,11的活性明显强于化合物1,2,而化合物9的活性又优于化合物11。初步的构效关系显示,结构中糖苷基团的存在与甲氧基的缺失可能增强花锚中（口山）酮类成分抗肝损伤作用。通过对花锚提取物及分离所得的单体化合物体外抗乙、丙肝肝炎病毒研究发现,大部分样品结果呈阴性或仅有个别化合物有微弱的抑制作用。可见花锚并不能对抗HBV与HCV病毒的复制生长,而是对肝炎病毒或其他肝脏疾病引起的肝细胞损伤起到缓解与修复作用。通过小鼠颅盖骨与骨髓细胞的共同培养系统对大量天然药物进行了体外抑破骨细胞作用筛选,发现花锚的氯仿与正丁醇层萃取物作用较强,抑制率达75%以上。以去卵巢大鼠为实验对象,对花锚氯仿与正丁醇层萃取物进行了体内抗骨质疏松症研究,结果显示这两部分萃取物可有效地对抗去卵巢大鼠子宫系数的降低,升高大鼠血清中雌二醇的含量,并能降低大鼠血清中ALP水平,改善大鼠的骨生物力学指标,增加骨密度,对预防去卵巢大鼠骨质疏松的发生起到一定的作用。在此基础上,对这两部分萃取物中分离得到的17个化合物进行了体外抑破骨细胞实验筛选,结果显示大部分（口山）酮类与黄酮类化合物均表现出较好的活性,其中,化合物1-4,7,12抑破骨细胞样细胞生成作用较其余化合物显著。构效关系表明,（口山）酮结构中1位羟基的存在可能是其抑制破骨细胞生成的重要因素之一,而3位羟基却削弱了其活性作用。上述6个化合物中除化合物7外,其余5个化合物还能有效抑制破骨细胞骨吸收,降低成熟破骨细胞的存活率,提示这些化合物可以从不同方面起到抑制骨吸收的作用。同时,对成骨细胞的作用研究发现,这6个化合物均能在不同程度上提高成骨细胞的ALP活性,可促进成骨细胞增殖,化合物1,4,7还可明显增加成骨细胞矿化结节数量,表现出促进成骨细胞形成的作用,结果表明这些化合物对促进骨形成作用也有一定的影响。
|