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具有区段定向诱导分化活性的仿生组织工程韧带的研究

作　者: 李立群
导　师: 王洪
学　校: 华中科技大学
专　业: 外科学
关键词: 组织工程韧带交联剂骨形态发生蛋白-2 小肠粘膜下层小鼠胚胎成骨细胞
分类号: R318.08
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 8次
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内容摘要

目的:制备猪小肠粘膜下层(SIS),将其作为组织工程韧带的支架材料,应用同基双功能交联剂SS-PEG3400-SS与重组人骨形态发生蛋白-2(BMP-2)进行共价偶联,并随后与SIS进行共价交联反应,以研究经过共价偶联固化了BMP-2的SIS在缓慢降解的同时,是否可以随着其降解而长时间自发释放BMP-2,从而持续刺激小鼠胚胎成骨细胞株(MC3T3-E1)向成骨细胞定向分化。方法:将BMP-2与同基双功能交联剂SS-PEG3400-SS进行共价交联,然后将交联后的产物与制备的SIS进行共价偶联,从而间接将BMP-2固化在SIS上。用透射电镜对交联后的SIS进行形态学观察,并评估MC3T3-E1细胞在与多种不同SIS上的增殖及定向分化情况。同时比较与BMP-2共价偶联后的SIS与未与BMP-2共价偶联的SIS上钙结节的数量及碱性磷酸酶活力值,结果采用SPSS11.0软件进行统计学分析。结果:与未修饰的BMP-2相比,共价修饰后的BMP-2仍具有生物活性。通过将交联剂SS-PEG3400-SS与主要成分为胶原的SIS进行交联,可减慢SIS在体外的降解速度,并且共价交联的BMP-2可随着SIS的降解而长时间释放,从而能持续刺激MC3T3-E1细胞向成骨方向分化。结论:BMP-2通过同基双功能交联剂SS-PEG3400-SS与SIS共价偶联。共价偶联了BMP-2的SIS能更好刺激与其复合培养的MC3T3-E1细胞向成骨方向定向分化。

全文目录

摘要  6-7
Abstract  7-9
一、前言  9-11
二、材料和方法  11-15
  （一）实验材料  11-12
    1. 实验试剂  11-12
    2. 实验装置  12
    3. 实验其他材料  12
  （二）实验方法  12-15
    1. SIS的制备  12
    2. (BMP-2)-PEG3400-SIS 材料复合物的制备  12-13
    3. MC3T3-E1 细胞的培养  13
    4. BMP-2 与SS-PEG3400-SS 共价交联后诱导MC3T3-E1 细胞定向分化的能力  13-14
    5. MC3T3-E1 细胞在SIS 上的增殖分化  14
    6. 倒置相差显微镜观察  14-15
    7. 透射电镜观察  15
    8. 成骨鉴定  15
    9. 统计学分析  15
三、结果与讨论  15-18
四、结论  18-19
五、参考文献  19-24
附录一  24-27
综述  27-38
  0 引言  27
  1 自体移植物材料  27-30
  2 同种异体肌腱移植物材料  30-32
  3 人工材料移植物  32
  4 小结  32-33
  5 参考文献  33-38
附录二  38-39
致谢  39

具有区段定向诱导分化活性的仿生组织工程韧带的研究

内容摘要

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