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肾细胞癌差异蛋白质发现与筛选的实验研究

作　者: 柳金顺
导　师: 李汉忠；纪志刚；毛全宗
学　校: 北京协和医学院
专　业: 泌尿外科
关键词: 肾细胞癌差异蛋白肿瘤组织癌标志物癌旁正常组织血清蛋白质特异性结合良性占位差异表达 carcinoma 实验研究浸润转移 SELDI TOF 蛋白质组学 Biomarker 肾脏诊断模型血清检测透明细胞癌
分类号: R737.11
类　型: 博士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的：应用蛋白质组学技术比较肾细胞癌肿瘤组织与癌旁正常组织、肾癌与肾脏良性占位血清蛋白质表达谱,寻找差异表达的蛋白质。方法：第一部分应用双向电泳分离肾细胞癌及癌旁正常组织蛋白,应用MALDI-TOF/TOF-MS鉴定差异蛋白质；第二部分应用磁珠、MALDI-TOF-MS技术检测肾细胞癌、肾脏良性占位患者血清,发现差异表达的蛋白峰,初步建立肾细胞癌的质谱诊断模型。结果：第一部分成功建立了肾癌、癌旁正常组织的双向电泳蛋白质表达谱；共发现10个差异表达2倍以上的蛋白质点,其中8个蛋白质成功进行了质谱鉴定,肾癌组织膜联蛋白Ⅳ、21染色体开放读码框33蛋白、铁蛋白轻链等蛋白表达上调；酰化氨基酸水解酶-1、ATP合成酶d亚基a亚单位、乳酸脱氢酶H链、组蛋白H2b1等蛋白表达下调第二部分肾癌组与肾脏良性占位组比较,在血清共发现7个差异蛋白峰,应用m/z2945.35、m/z15340.8、m/z6984.51、m/z5819.23这4个蛋白峰建立肾癌诊断模型,诊断肾癌的敏感性83.0%,特异性84.6%；盲法验证,敏感性为80%,特异性81.8%。肾癌局限组与浸润转移组相比,共有17个差异蛋白峰,m/z3686.10、m/z33381.7建立诊断模型,诊断肾癌浸润转移的敏感性100%,特异性66.7%。结论1、蛋白质组学技术是研究肾癌的有力工具；2、细胞代谢酶、细胞骨架蛋白等多种蛋白可能参与了肾癌的病理过程；3、磁珠联合MALDI-TOF-MS可以应用于肾癌血清检测,发现差异蛋白峰,建立诊断模型；4、分析这些差异蛋白有助于肾癌标志物的发现。

全文目录

摘要  5-6
ABSTRACT  6-8
缩略词表  8-9
第一部分  9-51
  前言  9-14
  实验线路图  14-15
  材料和方法  15-29
  实验结果  29-39
  讨论  39-45
  小结  45-46
  参考文献  46-51
第二部分  51-79
  前言  51-54
  实验线路图  54-55
  材料和方法  55-59
  实验结果  59-71
  讨论  71-75
  小结  75-76
  总结  76-77
  参考文献  77-79
综述  79-90
  参考文献  86-90
个人简历  90-91
致谢  91

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