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长期能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响

作　者: 林旋豪
导　师: 傅玉才
学　校: 汕头大学
专　业: 遗传学
关键词: 能量限制 大鼠 生殖寿命 卵巢 卵泡发育
分类号: S865.12
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


研究目的探讨长期不同强度的能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响,观察不同强度能量限制对卵泡发育、生育能力以及卵巢寿命的影响。材料与方法取6月龄雌性SD大鼠30只,分为对照(NC)组、能量限制(calorie restriciton, CR)20%组和CR40%组,记录NC组每日摄食量,并将此摄食量的80%和60%分别喂养CR20%组和CR40%组大鼠。限食实验开始后的第一个月内两天记录一次大鼠体重;第二到第四个月大鼠生育2窝仔鼠观察生育力,因其处于妊娠阶段,不记录体重;第五个月开始到实验结束,每个月称量大鼠体重两次监测大鼠体重变化。实验开始前和实验开始后第1、5、7、9和11个月分别做阴道涂片监测动情周期。实验开始前和实验开始后第1、5、9和12个月分别取血一次监测血清激素(促性腺激素释放激素(GnRH)、黄体生成素(LH)和糖皮质激素(Cortisone))变化,12个月后取大鼠卵巢制作组织切片。从卵巢最大切面往两边依次选取7张组织切片用于苏木精-伊红染色,计数每张切片上不同发育阶段卵泡的数量,计算7张切片上健康卵泡总数和各级卵泡数量占健康卵泡总数的百分比。为了进一步细分和全面观察不同程度CR对大鼠卵泡发育和卵巢寿命的影响,我们在第一批大鼠实验开始后又补充了2个CR组,即CR10%和CR30%。其实验设计与第一批大鼠完全相同。结果在实验过程中NC组大鼠体重持续上升,而CR20%组体重小幅增加,CR40%组体重持续下降。CR20%组、CR40%组卵巢湿重和体重的比值与NC组相比均有所增加,但差异无统计学意义。限食1个月后,连续生育2窝仔鼠观察大鼠生育力。与NC组生育的仔鼠数(9.3±1.2,9.3±1.3)及其体重(6.69±0.54 g,6.27±0.24 g)相比,CR20%组的仔鼠数(10.2±1.2,9.2±0.7)相近,第一窝仔鼠体重减轻(5.99±0.44),且差异有统计学意义(P<0.05),但第二窝仔鼠体重相近(6.24±0.16 g)。CR40%组只生育了一窝仔鼠,且仔鼠数(9.3±1.2 vs. 4.5±3.7)及其体重(6.69±0.54 g vs. 5.12±0.33 g)与NC组相比差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.001)。CR40%组大鼠的健康卵泡数量(105.7±9.5 vs. 51.2±5.4)和原始卵泡数量(55.0±6.8 vs. 18.3±3.7)均显著多于NC组(P<0.001,P<0.001),原始卵泡比例(52.1%±2.9% vs. 35.8%±5.5%)也显著大于NC组(P<0.001),而成熟卵泡比例(6.8%±1.9% vs. 15.6%±6.2%)和发育卵泡比例(41.2%±3.0% vs. 48.9%±4.2%)则显著小于NC组(P<0.001,P<0.05),其闭锁卵泡比例(52.7%±2.9% vs. 56.1%±1.8%)与NC组相比有所降低,但差异无统计学意义。CR20%组卵泡数量和各级卵泡比例与NC组相比差异无统计学意义。第二批大鼠与第一批结果趋势一致,相比NC组,CR10%组和CR30%组的原始卵泡、发育卵泡、健康卵泡和闭锁卵泡总数均增加。与NC组相比,CR30%组健康卵泡比例(48.7%±2.1% vs. 43.9%±1.8%)上升且差异有统计学意义(P<0.05);而闭锁卵泡比例(51.3%±2.1% vs. 56.1%±1.8%)下降,差异有统计学意义(P<0.05)。CR10%组(49.5%±4.9% vs. 35.8%±5.5%)和CR30%组(42.3%±6.5% vs. 35.8%±5.5%)的原始卵泡比例与NC组相比显著增加(P<0.001,P<0.05),CR10%组的发育卵泡比例(46.9%±5.3% vs. 48.9%±4.2%)、成熟卵泡比例(3.6%±2.5% vs. 15.6%±6.2%)下降,且成熟卵泡与NC组相比显著下降(P<0.001)。CR30%组的发育卵泡(46.6±5.1 vs. 48.9±4.2)、成熟卵泡比例(11.1±1.8 vs. 15.6±6.2)下降,且成熟卵泡与NC组相比显著下降(P<0.05)。限食1个月后,连续生育2窝仔鼠观察大鼠生育力。与NC组生育的仔鼠数(9.3±1.2,9.3±1.3)及其体重(6.69±0.54 g,6.27±0.24 g)相比,CR10%组的仔鼠数(7.7±1.3,8.9±1.2)减少,其仔鼠体重(6.03±0.18 g,5.91±0.18 g)减轻,但差异均无统计学意义(P>0.05)。CR30%组的仔鼠数(6.0±0.7,6.3±0.3)减少、体重(6.44±0.29 g,5.62±0.15 g)减轻,且仔鼠数及第二窝仔鼠体重与NC组相比差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.001)。结论长期能量限制可能通过抑制原始卵泡的发育启动、减少发育卵泡和成熟卵泡的数量,从而减少卵泡的消耗,有益于延长生殖寿命,但其对卵泡闭锁的抑制效果不明显。高强度的CR(CR30%、CR40%)会降低大鼠的生育能力,而中低强度的CR(CR20%、CR10%)对大鼠生育能力无明显影响。然而高强度的CR比中低强度的CR对延长大鼠卵巢寿命的效果更加显著。

全文目录


摘要  3-5
Abstract  5-8
第一章 前言  8-11
第二章 实验材料和仪器  11-12
  2.1 实验动物  11
  2.2 主要试剂  11
  2.3 主要仪器  11-12
第三章 实验方法  12-18
  3.1 实验动物及其处理  12-13
    3.1.1 实验动物  12
    3.1.2 实验动物处理  12-13
  3.2 生殖力测试  13
  3.3 动情周期监测  13-14
  3.4 吉姆萨染色  14
  3.5 血清激素检测  14-15
  3.6 卵巢收集及组织切片  15
  3.7 苏木素-伊红染色  15-16
  3.8 卵泡分类  16-17
  3.9 统计学分析  17-18
第四章 实验结果  18-31
  4.1 大鼠状态  18
  4.2 体重及器官重量  18-20
  4.3 生育力  20
  4.4 动情周期  20-21
  4.5 血清激素水平  21-24
  4.6 卵泡储备  24-25
  4.7 卵泡发育  25-26
  4.8 补充实验  26-31
    4.8.1 体重及器官重量  26-28
    4.8.2 生育力  28
    4.8.3 动情周期  28-29
    4.8.4 卵泡储备和发育  29-31
第五章 讨论  31-36
第六章 结论  36-37
参考文献  37-42
综述  42-55
  参考文献  50-55
附录  55-57
致谢  57-59
发表论文情况  59-60
个人简历  60

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 狩猎、野生动物驯养 > 各种野生动物驯养 > 实验用动物 > 大白鼠
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