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中药复方左归丸、右归丸和济生肾气丸的鉴别和质量评价研究

作　者: 王丽双
导　师: 邹华彬
学　校: 山东大学
专　业: 分析化学
关键词: 中药复方指纹图谱双指标 (?)Sr等级序列直观比对鉴别与质量评价左归丸右归丸济生肾气丸
分类号: TQ461
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

中药复方是中医临床用药的主要形式和手段,也是中医药治疗体系的精髓,具备了功效的多向性和适应的广泛性。中药复方的准确鉴别和质量评价研究是中医药现代研究的核心课题之一。中药复方由数种到数十种药材组成,含有几十至成百上千种化学成分,是非常复杂的生物体系。同剂型的中药复方产品外观几乎无差异,无法通过外观判断其品种及质量差异,相当于一个黑色体系,对其进行鉴别和质量评价具有重要的的理论意义和应用价值。目前有多种方法应用于中药复方的鉴别和质量评价,主要有直观比对法和模式识别法。模式识别法是主要的分析方法,可分为有监督模式识别法和无监督模式识别法。有监督模式识别法多适用于分析白色体系和灰色体系。该类方法依赖选择对照样本或标准样本,或已知样本的性质,根据先验经验建立鉴别和评价标准,不适合中药复方黑色体系的鉴别和质量评价研究；无监督模式识别法虽不需要训练集或经验知识,但它无法同时实现样本的聚类与分类,不能对样品所属类别做出明确的鉴别。本论文采用的双指标等级序列聚类分析法和⊿Sr等级序列分析法不需要训练集或经验知识,可归为无监督模式识别法,但它可同时实现样本的聚类与分类,兼有有监督和无监督两种模式识别法的特点。同时,⊿Sr等级序列分析法综合了样品成分种类及含量两个方面的信息,使分析结果更全面、客观,较只考虑指纹峰峰位的双指标等级序列聚类分析法具有更强的鉴别能力。更适合中药HPLC色谱指纹图谱的研究。左归丸、右归丸和济生肾气丸是三种治疗肾虚的著名中药复方产品。其中,左归丸由八味中药材组方而成,右归丸和济生肾气丸分别由十味中药材组方而成。左归丸和右归丸组方中含有六味相同的中药材熟地黄、山药、枸杞、鹿角胶、菟丝子、山茱萸；右归丸和济生肾气丸组方中含有五味相同的中药材熟地黄,山茱萸,山药,制附子,肉桂。本论文以这三种成分组成非常相近的中药复方产品为代表进行了研究,对其进行鉴别和质量评价。本论文采用系统溶剂(依次为氯仿、无水乙醇、水)分别提取左归丸、右归丸和济生肾气丸样品不同极性区间的成分。测试三种中药复方样品系统溶剂提取物和原药粉末的红外指纹图谱以及无水乙醇提取物的高效液相色谱指纹图谱和核磁共振指纹图谱。在红外指纹图谱的分析中,采用双指标等级序列聚类分析法分别对右归丸和济生肾气丸、左归丸和右归丸进行了鉴别和质量评价研究。其中,在右归丸和济生肾气丸的鉴定中,首次发展了传统的直观比对法,依据正态分布规律,判别两种中药复方的FITR指纹图谱中的特征峰组,并确定其对应的化合物类型,结合原药粉末的EDS谱中多种元素的种类和含量信息,对两种中药复方实现快速准确鉴别。在HPLC指纹图谱和核磁共振指纹图谱的分析中,采用双指标等级序列聚类分析法和⊿Sr等级序列分析法对这三种中药进行鉴别和质量评价研究。本论文共分为五章：第一章：在查阅大量中药指纹图谱文献的基础上,对中药指纹图谱的构建技术方法、数据解析方法等进行了综述。同时概述了研究对象左归丸、右归丸和济生肾气丸三种中药复方产品的组方及其各单味药材的主要化学成分。介绍了本论文所采用的指纹图谱解析方法及方法上的创新。第二章：应用双指标等级序列聚类分析法对右归丸和济生肾气丸的红外指纹图谱进行了分析。结果表明,该法能够准确区分这两种中药复方产品,三种系统溶剂提取物(氯仿、乙醇、水)和原药粉末的红外指纹图谱总体上均能实现两种中药的准确鉴别。首次发展了传统的直观比对法,根据两种中药复方的FITR指纹图谱中的特征峰组及其对应的化合物类型和原药粉末的EDS谱中多种元素的种类和含量信息,对两种中药复方实现快速准确鉴别。第三章：应用双指标等级序列聚类分析法对左归丸和右归丸的红外指纹图谱进行了分析。结果表明,该法能够较准确地区分这两种中药复方产品。氯仿提取物、乙醇提取物和原药粉末聚类结果合理可靠,原药粉末聚类结果最优,水提取物聚类结果相对较差。第四章：应用双指标等级序列聚类分析法、⊿Sr等级序列分析法对左归丸、右归丸和济生肾气丸这三种中药复方产品HPLC指纹图谱进行了分析。结果表明,⊿Sr等级序列分析法可较准确地区分三种组成相似的中药复方产品,其鉴别准确性明显地高于基于共有峰率的双指标等级序列聚类分析结果。该法利用了色谱指纹峰峰位及峰面积两方面的信息,较适用于中药复方色谱指纹图谱的分析。第五章：应用双指标等级序列聚类分析法对左归丸、右归丸和济生肾气丸这三种中药复方产品核磁共振指纹图谱进行了分析。结果表明,能准确地区分这三种组成相似的中药,且化学位移小于4.2特征段数据的聚类结果比化学位移大于4.2特征段数据的结果相对要好。

全文目录

中文摘要  10-13
ABSTRACT  13-17
第一章绪论  17-44
  1.1 中药指纹图谱技术研究进展  17-36
    1.1.1 中药指纹图谱的分类  19-28
    1.1.2 中药指纹图谱解析方法  28-36
    1.1.3 小结  36
  1.2 本论文的研究对象及研究方法  36-44
    1.2.1 研究对象  36-38
    1.2.2 研究方法  38-44
第二章右归丸和济生肾气丸红外指纹图谱的建立与分析  44-64
  2.1 实验材料  44
  2.2 最佳提取条件  44-45
  2.3 测试样品制备及测试条件  45-46
  2.4 重复性实验  46-47
  2.5 稳定性实验  47
  2.6 数据处理与结果分析  47-58
    2.6.1 氯仿提取物红外指纹图谱及分析  47-50
    2.6.2 无水乙醇提取物红外指纹图谱及分析  50-52
    2.6.3 水提物红外指纹图谱及分析  52-55
    2.6.4 原药粉末红外指纹图谱及分析  55-57
    2.6.5 双指标等级序列聚类分析结果总结  57-58
  2.7 采用FTIR和EDS图谱直观比对鉴定右归丸和济生肾气丸  58-64
    2.7.1 氯仿提取物红外指纹图谱和数据  58-62
    2.7.2 原药粉末电子能谱(EDS)及其直观比对分析  62-63
    2.7.3 结论  63-64
第三章左归丸和右归丸红外指纹图谱的建立与分析  64-78
  3.1 实验材料  64
  3.2 最佳提取条件  64
  3.3 测试样品制备及测试条件  64
  3.4 重复性实验  64-65
  3.5 稳定性实验  65-66
  3.6 数据处理与结果分析  66-77
    3.6.1 氯仿提取物红外指纹图谱及分析  66-69
    3.6.2 无水乙醇提取物红外指纹图谱及分析  69-71
    3.6.3 水提取物红外指纹图谱及分析  71-74
    3.6.4 原药粉末红外指纹图谱及分析  74-77
  3.7 本章小结  77-78
第四章左归丸、右归丸和济生肾气丸HPLC指纹图谱的建立与分析  78-88
  4.1 实验材料  78
  4.2 样品制备及色谱条件  78-80
  4.3 重复性实验  80
  4.4 稳定性实验  80
  4.5 数据处理与结果分析  80-87
    4.5.1 双指标等级序列聚类分析  83-85
    4.5.2 ⊿Sr等级序列分析  85-87
  4.6 本章小结  87-88
第五章左归丸、右归丸和济生肾气丸1~H-NMR指纹图谱的建立与分析  88-96
  5.1 实验材料  88
  5.2 样品制备及实验条件  88
  5.3 重复性实验  88
  5.4 数据处理与结果分析  88-95
    5.4.1 化学位移小于4.2特征段的数据分析  91-94
    5.4.2 化学位移大于4.2特征段的数据分析  94-95
  5.5 本章小结  95-96
结束语  96-98
参考文献  98-106
致谢  106-107
附录  107-133
攻读学位期间发表的学术论文  133-134
学位论文评阅及答辩情况表  134

中药复方左归丸、右归丸和济生肾气丸的鉴别和质量评价研究

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