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九百锤药液抗风湿作用的机理研究

作　者: 张金红
导　师: 陈龙全
学　校: 湖北中医学院
专　业: 方剂学
关键词: 九百锤药液类风湿关节炎动物实验弗氏完全佐剂机理研究
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

目的:类风湿关节炎(RA)是当前世界范围内严重威胁公众健康的慢性疾病之一。其致残率高,直接影响到患者的生活质量。属祖国医学“痹症”范畴,由于其病程缠绵难愈,又有“顽痹”、“尪痹”之称。目前在治疗上尚无疗效理想且毒副作用小的药物,因此,探索能有效地改善类风湿关节炎症状和预后,延缓关节损害而其不良反应可减少的综合治疗方案,具有重要的学术和应用价值。本课题以九百锤药液为研究对象,以类风湿关节炎的临床表现为研究切入点,采用佐剂性关节炎(AA)大鼠作为实验模型,观察其对炎症、疼痛、血流变的影响,进而探讨九百锤药液治疗类风湿关节炎的可能作用机制,为临床使用提供实验依据。方法:(1)动物:WISTAR健康大鼠50只,雄性,体重200±20g;昆明种健康小鼠80只,雌雄各半,体重20±2g。以上动物均为Ⅱ级清洁级,由湖北民族学院医学院实验中心提供。(2)模型复制:取冻干卡介苗素1支(50mg),70℃水浴1h灭活,混入高压灭菌液体石蜡油和羊毛脂(2:1)的混合物10ml中研匀,制成完全弗氏佐剂(FCA)。取体重200±20g雄性大鼠,以FCA在每鼠右后足趾皮内注射0.1ml致炎,复制佐剂性关节炎(AA)大鼠模型。(3)分组及给药方案:造模成功的大鼠随机分为4组,每组10只;其中A组大鼠不给予任何处理,作正常组进行对照。即A组:正常对照组;B组:空白模型组;C组:正清风痛宁对照组;D组:九百锤药液高剂量组;E组:九百锤药液低剂量组。以上5组大鼠统一用苦味酸标志为1～10号,每鼠给药容积为10ml/kg·d。正常对照组和空白模型组均以同体积的生理盐水10ml/kg·d灌胃给药;正清风痛宁组,服药剂量为30mg/kg·d,将正清风痛宁粘成细末,加生理盐水配成混悬液,浓度为3mg/ml;将九百锤药液用蒸馏水以1:1煎煮两次,两次药液混合过滤,滤液浓缩为0.662g生药/ml,九百锤药液高、低剂量组的给药剂量分别为6.62g/kg·d、3.31g/kg·d。均于造模前1d开始用灌胃给药,1次/d,连续22d。实验1:对大鼠佐剂性关节炎原发病变及继发病变的影响实验2:对佐剂性关节炎大鼠血液流变学改变的影响实验3:对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响实验4:对小鼠痛觉的影响(热板法)(4)统计学处理:所有数据均用(?)±s表示,组间差异比较采用t检验。结果:(1)对动物模型的分析与评价:根据实验过程中,模型动物在外观、体重、活动度、关节局部肉眼可见的病理变化及全身改变等情况(精神萎靡,体重减轻,食欲下降,皮毛失去光泽,关节肿胀、活动不便,耳廓充血,皮下结节等),我们可以得出这样的结论:动物造模取得满意效果。该种动物模型是得到世界公认的模型,病理改变为滑膜下组织炎症,滑膜增生,血管翳形成,关节软骨和骨组织结构的破坏。具有实际的实验价值。(2)九百锤药液对足趾肿胀的抑制方面:九百锤药液高、低剂量组均能抑制大鼠足趾肿胀,与空白模型组比较具有显著性差异(p＜0.05或p＜0.01),而九百锤药液高剂量组与正清风痛宁组相比,也具有显著性差异(p＜0.05),说明在对AA大鼠原发病和继发病的防治方面,九百锤药液高剂量组的疗效优于正清风痛宁组,正清风痛宁组与九百锤药液低剂量组疗效相当(p＞0.05)。(3)血流动力学改变显示:与空白模型组相比,九百锤药液组对大鼠血液流变学呈现多方面的影响,具体表现为能降低红细胞压积和血浆粘度,同时降低红细胞聚集指数,从而呈现出全血粘度和全血还原粘度下降。提示九百锤药液可以改善血液呈现的高凝和高粘状态,促进和恢复微循环的正常状态,增加肢体营养,减轻肢体损伤,从而发挥抗类风湿关节炎的综合作用。(4)九百锤药液对小鼠二甲苯性炎症和热板性疼痛方面的影响:九百锤药液高、低剂量组对二甲苯诱发的小鼠急性渗出性炎症(耳廓肿胀)有明显的抑制作用,与生理盐水组比较具有显著性差异(p＜0.05或p＜0.01);镇痛实验采用小鼠热板法疼痛模型观察该药液的镇痛作用,结果显示九百锤药液能提高小鼠热刺激所致疼痛的痛阈值,提高痛阈百分率,并且延长痛阈潜伏期,与生理盐水组比较具有显著性差异(p＜0.05或p＜0.01)。并随着剂量的增加而镇痛作用增强。结论:实验研究证明,九百锤药液具有显著的抗炎、镇痛作用,可显著抑制AA大鼠足趾肿胀及多发性关节炎,提高AA大鼠的压力耐痛值,改善AA大鼠的免疫器官指数,同时明显减轻病变关节滑膜炎症与增生、防止关节软骨及骨质的破坏;通过降低全血粘度和全血还原粘度进而可以改善血液呈现的高凝和高粘状态,促进和恢复微循环的正常状态。该方组方合理,切合RA病机,疗效确切,方便价廉,值得进一步研究,为临床推广与应用创造更加完善和充实的科研理论条件,以期造福患者。

全文目录

中文摘要  5-8
英文摘要  8-11
英文缩略词对照表  11-12
前言  12-14
材料和方法  14-18
  1 材料  14
  2 方法  14-18
结果  18-22
  1 九百锤药液对大鼠一般情况的影响  18
  2 足趾肿胀度比较  18-19
    2.1 对原发病变的影响  18-19
    2.2 对继发病变的影响  19
  3 对血液流变学指标的影响  19-21
  4 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响  21
  5 对疼痛反应的影响—热板法  21-22
讨论  22-33
  1 祖国传统医学对痹症的论治  22-25
    1.1 病名确定  22
    1.2 基本概述  22-23
    1.3 病因病机  23-24
    1.4 证侯特征  24
    1.5 治疗原则  24-25
  2 现代医学对 RA的探讨  25-27
    2.1 病因学说  25-26
    2.2 发病机制  26-27
    2.3 病理学特点  27
    2.4 西医治疗  27
  3 九百锤药液的理论研究  27-30
    3.1 九百锤药液组方原理分析  27-28
    3.2 九百锤药液治疗 RA的现代药理学依据  28-30
    3.3 活血通络、祛风除湿法的确立  30
  4 动物模型及指标选取依据  30-31
    4.1 关于动物模型的遴选  30-31
    4.2 关于实验观察指标的选取  31
  5 对照组(正清风痛宁片)的选择依据  31-32
  6 小结  32-33
参考文献  33-35
文献综述  35-43
致谢  43

九百锤药液抗风湿作用的机理研究

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