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缺氧条件下HIF-1α促进CD133阳性胰腺癌肿瘤干细胞增殖的研究

作　者: 朱正
导　师: 李德春
学　校: 苏州大学
专　业: 普通外科学
关键词: 缺氧 HIF-1α 胰腺癌 肿瘤干细胞 CD133 VEGF siRNA RNA干扰
分类号: R735.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的:研究HIF-1α在缺氧的环境下与CD133阳性胰腺癌肿瘤干细胞增殖的关系,探讨HIF-1α对胰腺癌肿瘤干细胞的调控作用。方法:1.人胰腺癌PANC-1细胞分成4组培养:常氧对照组、缺氧培养12小时组、缺氧培养24小时组、缺氧培养48小时组。应用半定量RT-PCR和Western-Blot方法,检测4组细胞中的HIF-1α和VEGF的mRNA和蛋白表达水平。应用流式细胞术检测常氧和缺氧48小时后细胞表面标记物CD133的表达水平。PANC-1分别在常氧和无氧条件下在DMEM/F12培养基中悬浮培养5天,然后计算其成球率,检测缺氧对肿瘤干细胞增殖的影响。2.利用阳离子脂质体Lipofectamine?2000将筛选出来的HIF-1αsiRNA转入PANC-1细胞内。同样方法检测常氧和缺氧条件下HIF-1α、VEGF和CD133的表达以及细胞成球实验。结果:1.缺氧条件下,PANC-1细胞HIF-1α和VEGF在mRNA水平和蛋白水平均明显升高(P<0.01),CD133表达水平也相应上调(P<0.05),细胞成球率较常氧明显增加。2. HIF-1α-siRNA转染PANC-1后能显著下调HIF-1α的基因表达,同时VEGF的表达也受到明显抑制。缺氧条件下CD133表达水平随之明显下降,细胞成球率较未干扰组明显减少。结论:缺氧状态下,PANC-1中CD133阳性的胰腺癌干细胞较常氧下明显增加,这种增加可以为HIF-1α的siRNA干扰所阻断,说明在缺氧状态下,HIF-1α可促进胰腺癌PANC-1细胞系中具有干细胞特性的CD133阳性细胞的增殖,阻断HIF-1α的表达可明显减少CD133阳性肿瘤干细胞的增殖,这为进一步研究胰腺癌肿瘤干细胞在胰腺癌发生、发展中的作用作一探索。

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 胰腺肿瘤
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