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棉花生防芽孢杆菌A57、A178的抑菌机理、拮抗活性物质及防病、促生作用

作　者: 陈莉
导　师: 缪卫国；范咏梅；赵震宇
学　校: 新疆农业大学
专　业: 植物病理学
关键词: A57、A178 棉花病害 抑菌机理 防病 促生
分类号: S435.62
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 321次
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内容摘要


本试验对拮抗细菌A57、A178进行了种的分类地位的鉴定,研究了拮抗细菌A57、A178对棉花立枯病菌、棉花枯萎病菌和棉花黄萎病菌的抑菌机理,初步研究了A57、A178产生的拮抗物质主要成分及拮抗物质的理化性质,同时初步研究了两株菌对植物的促生作用和棉花立枯病、棉花枯萎病和棉花黄萎病的室内防治试验,研究结果如下:1 A57、A178分类地位的鉴定通过培养形态、生理生化特征以及16SrDNA的分子序列同源性分析,16SrDNA测序结果在GeneBank数据库进行同源性比较,确定A57为短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevs),A178菌株为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)。2 A57、A178的抑菌机理通过平板对峙培养法,发现A57、A178对棉花立枯病菌、棉花枯萎病菌和棉花黄萎病菌具有较强的抑菌作用,通过显微镜观察,发现拮抗细菌A57、A178的主要拮抗机理是通过产生拮抗物质造成病原真菌菌丝体断裂、扭曲、畸形,抑制分生孢子的萌发,造成孢子畸形。3 A57、A178抑菌物质的提取和拮抗物质的理化性质采用不同浓度硫酸铵盐沉淀法提取拮抗蛋白。以枯萎病菌作指示菌,结果表明A57、A178在70%的硫酸铵饱和度下粗提蛋白的拮抗活性最大,抑制率分别为23.7%、22.3%。分别对A57、A178粗提蛋白理化性质研究,结果表明两菌粗提蛋白对热均稳定,对氯仿均不敏感,对胰蛋白酶均为敏感;A57、A178拮抗活性最佳pH值为pH5-pH7,强酸pH3和强碱pH9条件下仍具有部分的拮抗活性。4 A57、A178的防病、促生作用利用A57、A178无细胞滤液不同稀释度处理棉花种子对立枯病、枯萎病和黄萎病进行营养钵试验, A57和A178稀释10倍液对枯萎病的防效相当,分别是56.8%,54.4%;A178稀释10倍无细胞滤液对立枯病菌的防效最好,防效是63.1%。通过A57、A178不同稀释度无细胞滤液培养棉花无菌胚,发现无细胞滤液对幼苗均具有一定的促生作用,其中A57稀释10倍液对胚根造成肿大、畸形现象;从无细胞滤液处理生长的幼苗提取浸提液,以枯萎病菌作指示菌检测拮抗活性,结果发现仍有一定的拮抗作用,A57、A178的抑制率分别为5.7%、7.6%。

全文目录


摘要  3-4
Abstract  4-9
第一章 文献综述  9-24
  1 拮抗细菌种类及其在土传性病害中的应用  9-12
    1.1 拮抗细菌种类及在生物防治中的优势  10
    1.2 国外研究进展  10-11
    1.3 国内研究进展  11-12
  2 拮抗细菌对土传性病害的抑菌机理  12-15
    2.1 拮抗作用  12
    2.2 竞争  12
    2.3 溶菌作用  12-13
    2.4 诱导抗性  13-15
  3 拮抗细菌产生的拮抗物质  15-17
    3.1 芽胞杆菌产生的拮抗物质  15-17
    3.2 假单胞菌产生的拮抗物质  17
  4 抑菌蛋白的粗提、纯化技术及纯化方案的选择  17-22
    4.1 抑菌蛋白的粗提  18-19
    4.2 抑菌蛋白的纯化  19-21
    4.3 抑菌蛋白纯化方案的优化  21-22
  5 生防细菌在实际中的应用  22-24
    5.1 影响生物防治效果的一些重要因素  22
    5.2 生防细菌的遗传改良  22-23
    5.3 问题及展望  23-24
第二章 拮抗细菌A57、A178 分类地位的鉴定  24-35
  1 材料与方法  24-27
    1.1 供试材料  24
    1.2 菌体形态观察和染色反应  24
    1.3 生理生化测定  24-26
    1.4 16SrDNA 的分子序列同源性分析  26-27
  2 结果与分析  27-33
    2.1 A57 的鉴定结果  27-29
    2.2 A178 的鉴定结果  29-33
  3 讨论  33-35
第三章 芽孢杆菌A57、A178 抑菌机理的显微镜观测  35-44
  1 材料与方法  35-37
    1.1 供试材料  35-36
    1.2 拮抗细菌的抑菌作用测定  36
    1.3 拮抗细菌无细胞滤液的制备及拮抗活性测定  36
    1.4 拮抗细菌抑菌机理的显微镜观测  36-37
  2 结果与分析  37-42
    2.1 对峙培养中的拮抗细菌对病原菌的抑菌作用  37
    2.2 拮抗细菌无细胞滤液的拮抗活性  37-38
    2.3 拮抗机理的显微镜观测  38-41
    2.4 对分生孢子萌发和生长的影响  41-42
  3 讨论  42-44
第四章 拮抗细菌拮抗物质活性的最佳发酵条件及拮抗粗提蛋白的研究  44-59
  1. 材料与方法  44-48
    1.1 供试材料  44-45
    1.2 拮抗细菌A57 、A178 无细胞滤液拮抗活性的最佳液体发酵条件  45-46
    1.3 拮抗细菌A57、A178 拮抗粗提蛋白的分离与拮抗活性测定  46
    1.4 拮抗粗提蛋白的理化性质  46-48
    1.5 数据分析  48
  2 结果与分析  48-56
    2.1 A57 无细胞滤液拮抗活性的液体发酵条件  48-49
    2.2 A178 拮抗细菌无细胞滤液的液体发酵条件  49-52
    2.3 A57、 A178 拮抗活性物质的初步研究  52-53
    2.4 A57、A178 粗提蛋白的理化性质  53-55
    2.5 拮抗细菌A57、A178 突变体的筛选  55-56
  3 讨论  56-59
    3.1 拮抗活性的最佳液体发酵条件  56-57
    3.2 拮抗蛋白的理化性质  57-58
    3.3 拮抗细菌的抗生素的筛选  58-59
第五章 拮抗细菌的防病、促生作用  59-68
  1 材料与方法  59-61
    1.1 供试材料  59
    1.2 不同稀释度无细胞菌滤液对病原菌的抑制作用  59
    1.3 拮抗细菌防治病原真菌的营养钵实验  59-60
    1.4 无细胞滤液的促生作用  60-61
    1.5 数据分析  61
  2 结果与分析  61-66
    2.1 不同稀释度去菌滤液对不同病原菌的抑制作用  61-62
    2.2 拮抗细菌A57、 A178 防治棉花病原真菌的营养钵实验  62-64
    2.3 无细胞滤液的促生作用  64-65
    2.4 幼苗浸提液拮抗活性的研究  65-66
  3 讨论  66-68
第六章 结论与讨论  68-77
致谢  77-78
作者简介  78

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 农作物病虫害及其防治 > 经济作物病虫害 > 纤维作物病虫害 > 棉病虫害
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