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尖吻蝮蛇蛇毒对刚地弓形虫侵入宿主细胞的作用研究

作　者: 陈兴智
导　师: 沈继龙；孙新
学　校: 安徽医科大学
专　业: 病原生物学
关键词: 尖吻蝮蛇蛇毒 Hela细胞 THP-1细胞弓形虫速殖子侵入
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2003年
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内容摘要

目的：1 观察细胞培养系统中宿主细胞在不同剂量源自皖南地区的尖吻蝮蛇(Agkistrodon acutus)蛇毒的作用下感染刚地弓形虫速殖子的差异； 2 观察尖吻蝮蛇蛇毒对微量速殖子侵入宿主细胞时间的影响； 3 探讨运用尖吻蝮蛇蛇毒作为佐剂来提高细胞培养用于弓形虫病病原学珍断的敏感性。方法：1 以尖吻蝮蛇蛇毒加入分孔培养的Hela细胞中，分别用姬氏染色在普通光镜下，用IFA染色在荧光显微镜下计数，观察Hela细胞在该蛇毒作用下感染弓形虫速殖子的百分率； 2 以不同剂量尖吻蝮蛇蛇毒加入分孔培养的THP-1细胞中，用流式细胞仪进行荧光检测，观察THP-1细胞在不同剂量的尖吻蝮蛇蛇毒的作用下感染弓形虫速殖殖子的百分率； 3 以分孔培养的Hela细胞接种微量弓形虫速殖子，在初始时间加入相同剂量的尖吻蝮蛇蛇毒，观察其对弓形虫速殖子侵入宿主细胞时间的影响。结果：1 姬氏染色检测结果安徽派科大学硕十学位论文以105个/ml弓形虫速殖子感染Ilela细胞，在5.00 pg/ml和0.25 pg/耐尖吻蝮蛇毒作用下，经相同时间培养，姬氏染色观察结果表明，其宿J三细胞感染率分别比对照组提高了125.5%和81.4%。2 IFA检测结果以5.00 pg/Inl和0.25 pg/ml尖吻蝮蛇蛇毒加入llela细胞一速殖子培养系统，其细胞感染率均有明显提高，IJ个/ml速殖子组平均分别比对照组提高了159.0%和49.0%; 10‘个/ml组分别比对照组平均提高一r 1 27.0%和52.0%:10:，个/，。l至【L分别比对照组平均提高了73.0%和20.0%。3流式细胞仪检测结果不同剂量的尖吻蝮蛇蛇毒加入!I’l1，一l细胞一速她子培养系统，川流式细胞仪检测的结果显示，5.00 pg/ml和0.25 09/ml蛇毒作用下细胞感染率明显高于对照组，二者感染率分别比平均提高了196.5%和38.0%。4蛇毒对速殖子侵入宿主细胞时间的影响在尖吻蛇蛇毒的作用下微量接种的速筑子侵入宿主细胞的时问明显缩短，在含5.00 pg/ml尖吻蝮蛇蛇毒作用下，“ela细胞接种l『个速殖子/ml组于接种后45min出现速殖子，对照组Hela细胞中75min出现速殖子;l口个速殖子/m]组Ilelaha胞中60min出现速殖子，对照组Ilela细胞中105oin出现速殖子。5过量蛇毒的影响实验中发现10.0 09/ml可导致月ela细胞的中毒，3h后培养细胞出现细胞收缩、聚集成团、飘浮而死亡，而这一剂量下，fllP一l系培养细胞却没有出现死一亡现象。结论:Hela细胞与，flIP一l细胞在尖吻蝮蛇蛇毒的作用下在相同时间内感染弓形虫速殖子数量明显高于对照组，在剂量_L，以5.00 pg/ml为最适宜剂量;在5.00“g/ml剂量的作用下，可使弓形虫速致子进入宿主细胞的时间提1亩;过量的蛇毒可致细胞死亡。本研究提示尖吻蝮蛇蛇毒可以促进弓形虫速殖子侵入宿主细胞，在实际应用中，可以作为一种佐剂在检测标本时提高速殖子检出率，有利于缩短弓形虫的检出时间。

全文目录

一、中文摘要  3-5
二、英文摘要  5-8
三、论文  8-30
  1 前言  8-9
  2 材料和方法  9-14
  3 结果  14-23
  4 讨论  23-26
  5 结论  26-27
  6 参考文献  27-30
四、附录  30-32
  1 本人简历  30
  2 在学期间的研究成果目录  30-31
  3 英文缩略词表  31-32
五、致谢  32-33
六、综述及参考文献  33-43

尖吻蝮蛇蛇毒对刚地弓形虫侵入宿主细胞的作用研究

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