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莪术油对人卵巢癌细胞SKOV3凋亡机制的研究

作　者: 刘竹
导　师: 韩凤娟
学　校: 黑龙江中医药大学
专　业: 中医学
关键词: 莪术油卵巢癌 SKOV3细胞细胞凋亡
分类号: R737.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的观察不同浓度的莪术油注射液对人卵巢癌细胞株SKOV3的抑制作用,并探讨其可能的作用原理及机制,为该中药临床应用治疗卵巢癌提供实验依据。方法MTT法检测人卵巢癌细胞SKOV3,经不同浓度(120ug/ml、240ug/ml、480ug/ml、960ug/ml)莪术油处理后细胞的增殖情况,计算细胞抑制率(%)=(1-实验组吸光度值/对照组吸光度值)×100%。实验重复三遍,取三次结果的平均值。光学显微镜观察用药前后SKOV3细胞的形态学变化,实验分为空白对照组和实验组,实验组分设四个浓度：120u g/ml莪术油、240ug/ml莪术油、480u g/ml莪术油、960ug/ml莪术油,用药后培养48 h收集细胞,进行固定,HE染色。免疫组化法(按试剂盒说明书操作)分别检测对照组及实验组的细胞Bcl-2及Bax两种蛋白表达变化情况。结果1.莪术油对人卵巢癌SKOV3细胞的增殖具有抑制作用,其强度随着药物作用时间及浓度的增加而增强,呈时间一剂量依赖性2.莪术油对卵巢癌SKOV3细胞凋亡影响：空白对照组：细胞呈梭形或多边形,胞膜及胞核饱满,胞质丰富,呈粉红色,胞核为紫红色,居中,核形态不一,并可出现双核或多核现象,核仁清晰,细胞生长旺盛,未见凋亡小体。实验组：莪术油作用48h后,细胞形态发生明显变化。贴壁细胞减少,细胞肿胀,体积增大,边缘毛糙不规则,胞质浓缩,胞浆内出现致密颗粒细胞膜完整性破坏,部分出现核固缩,未见明显凋亡小体。3.免疫组化检测各组细胞Bax及Bcl-2两种蛋白表达情况,与对照组相比,实验组中Bax蛋白的表达明显升高,差异有统计学意义(p<0.05),而Bcl-2蛋白的表达则明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。结论1.莪术油对人卵巢癌细胞SKOV3具有明显的增殖抑制和诱导凋亡的作用。2.莪术油诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡中,可能与下调Bcl-2的表达以及上调Bax的表达有一定关系。

全文目录

缩略语表  4-5
摘要  5-7
ABSTRACT  7-9
前言  9-10
文献综述  10-27
  一.祖国医学对"癥瘕"的认识  10-15
    1. "癥瘕"病名研究  10-11
    2. "癥瘕"病因病机研究  11-13
    3. "癥瘕"治疗研究  13-15
  二.气滞血瘀型癥瘕的论述  15-16
  三.现代中医对癥瘕的认识  16-17
    1. 癥瘕的辨证分型  16
    2. 气滞血瘀型癥瘕的现代中医用药  16-17
  四.现代医学对卵巢癌的认识  17-27
    1. 卵巢癌的发病因素与高危人群研究  17-19
    2. 卵巢癌的诊断  19-23
    3. 卵巢癌的治疗疗  23-27
材料与方法  27-33
  一.材料  27-28
  二.方法  28-33
    1. 药品配制  28-29
    2. 细胞培养  29-30
    3. MTT法侧定生长抑制率  30
    4. 光镜观察凋亡细胞结构  30-31
    5. 免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达  31-33
结果  33-35
  1. 莪术油抑制SKOV3细胞生长的作用  33
  2. 显微镜观察结果  33-34
  3. 免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达  34-35
讨论  35-45
  1. 中医机理认识  35-38
    1.1 正虚邪恋,脏腑失调是主要病因  35-36
    1.2 气滞血瘀、痰湿凝聚、冲任失调是主要病机  36-38
  2. 治以"扶正固本、消癥散结"为主  38-39
    2.1 扶正固本、消癥散结为第一治法  38-39
    2.2 重视活血化瘀  39
  3. 单味药莪术分析  39-42
    3.1 莪术的别名及分布  39
    3.2 莪术治疗癥瘕的古文献研究  39-40
    3.3 莪术油药理研究  40-42
  4. 莪术油对卵巢癌细胞SKOV3的作用机制讨  42-45
    4.1 莪术油对卵巢癌细胞SKOV3增殖的抑制  42
    4.2 莪术油对卵巢癌细胞SKOV3形态学影响  42-43
    4.3 莪术油对凋亡基因Bax、Bcl-2的影响  43-45
结论  45-46
致谢  46-47
参考文献  47-53
附图  53-57
攻读硕士学位期间发表的论文  57-59
个人简历  59

莪术油对人卵巢癌细胞SKOV3凋亡机制的研究

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