学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

脂质运载蛋白2基因lcn_2在大鼠肝再生中作用研究

作　者: 崔胜男
导　师: 徐存拴
学　校: 河南师范大学
专　业: 细胞生物学
关键词: 大鼠 部分肝切除 肝再生 脂质运载蛋白2 尾静脉液压转基因 lcn2过表达 RNA干涉
分类号: Q343
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 7次
引　用: 1次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


脂质运载蛋白2基因lcn2编码的小分子分泌型蛋白是脂质运载蛋白家族的成员之一,在细胞增殖、分化和凋亡等多种生理过程中起调节作用。为探讨lcn2过量或降低表达对肝脏再生的作用,本文以大鼠再生肝为材料,参照lcn2的mRNA序列信息设计克隆引物和带酶切位点引物,采用分子克隆技术得到lcn2的克隆载体,测序证实正确后,以其为模板,进一步将基因克隆到真核表达载体pEGFP-N1上,构建出表达载体pEGFP-N1-lcn2;另外,同样参照lcn2的mRNA序列信息,利用锐博、Genesil、Ambion和QIAGEN等网站的在线设计工具,查阅siRNA设计相关论文,针对lcn2 mRNA的2个区域合成寡聚核苷酸片段连接到干涉载体pGenesil-1.0上,构建出2个干涉lcn2 mRNA的干涉载体pGenesil-1.0-l292和pGenesil-1.0-l616;酶切上述的表达载体pEGFP-N1-lcn2得到lcn2的ORF,将其连接到干涉载体pGenesil-1.0-l292和pGenesil-1.0-l616上,构建出干涉载体对应的检验载体pGenesil-1.0-l292-lcn2和pGenesil-1.0-l616-lcn2。用尾静脉液压转基因法,分别将构建的表达载体pEGFP-N1-lcn2、干涉载体pGenesil-1.0-l292和pGenesil-1.0-l616及检验载体pGenesil-1.0-l292-lcn2和pGenesil-1.0-l616-lcn2注入大鼠体内,用荧光显微技术观察肝组织的阳性细胞（数）,并检测转lcn2后大鼠死亡率、肝指数、肝再生率和组织形态结构的变化。电泳和测序检测表明,本论文构建的lcn2的表达载体、干涉载体和检验载体正确,有生物学作用。荧光显微检测表明,pEGFP-N1-lcn2、pGenesil-1.0-l292和pGenesil-1.0-l616载体的绿色荧光蛋白基因的表达高峰为12 h,pGenesil-1.0-l292-lcn2和pGenesil-1.0-l616-lcn2载体的绿色荧光蛋白基因的表达高峰为6 h。并且与对照载体pGenesil-1.0-hk-lcn2相比,检验载体pGenesil-1.0-l292-lcn2和pGenesil-1.0-l616-lcn2的绿色荧光蛋白阳性细胞率比对照低5%左右,初步说明设计合成的两个干涉片段均有一定干涉作用。肝指数检测表明,在转基因后120和168 h,转pEGFP-N1-lcn2载体组肝指数比对照和PH组小;在转基因后72、120和168 h,转pGenesil-1.0-l616-lcn2载体组肝指数均比PH组略大。肝再生率检测表明,在转基因后120 h,转pEGFP-N1-lcn2载体组肝再生率比PH组略大,但在转基因后168 h却明显比PH组和对照组小;在转基因后120 h,转pGenesil-1.0-l616载体组肝再生率几乎与对照和PH组重合,在168 h比两组肝再生率大。总之,本文克隆了lcn2基因,构建其表达载体、干涉载体和检验载体,根据体内检测结果初步判断lcn2与大鼠肝脏再生相关。

全文目录


相似论文

  1. 丙酮酸肌酸对大鼠蛋白质代谢的影响,S865.12
  2. 丹参酮ⅡA及烟酸对肥胖幼鼠心血管功能的影响,R285.5
  3. 骨髓间充质干细胞预移植1周对大鼠心肌缺血再灌损伤的修复作用,R542.22
  4. 甘草酸二铵脂质配位体对非酒精性脂肪肝炎大鼠的治疗作用及部分机制研究,R575.5
  5. 阿伐他汀对糖尿病大鼠肾脏骨桥蛋白表达的影响及其分子机制,R587.2
  6. 拘束冷应激对大鼠组织超微结构及HSP70表达的动态影响,S858.91
  7. 穴位埋线对哮喘模型大鼠IL-4等影响的实验研究,R245
  8. 植物异黄酮对去卵巢大鼠骨代谢影响的相关研究,R580
  9. 微波对坐骨神经损伤大鼠脊髓内GAP-43表达的影响,R651.3
  10. NF-κB与IL-6在大鼠极限门静脉结扎模型中的表达及作用机制,R657.3
  11. 大鼠股神经结扎损伤修复方法的实验研究,R651.3
  12. 大鼠颅内外动脉血管平滑肌细胞的体外培养与鉴定,R743.3
  13. 不同属种肉类对大鼠生长、消化代谢及抗氧化性的影响,S865.12
  14. 慢病毒介导hVEGF-165基因转染骨髓间充质干细胞治疗大鼠后肢缺血实验研究,R329
  15. 大鼠脑积水侧脑室周围神经干细胞的实验研究,R742.7
  16. 大鼠再生肝脏细胞周期的研究,Q253
  17. ERK1/2和JNK信号通路对大鼠再生肝8种细胞的增殖和凋亡调控作用研究,Q418
  18. 抗痛风胶囊对痛风性关节炎的治疗作用及机制,R259
  19. 归芩合剂治疗大鼠阿霉素肾病的实验研究,R285.5
  20. 大鼠骨髓间充质干细胞p38MAPK信号通路对机械应力刺激的反应,R329
  21. 去神经对大鼠肝再生的影响研究,R363

中图分类: > 生物科学 > 遗传学 > 遗传学分支学科 > 细胞遗传学
© 2012 www.xueweilunwen.com