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含Arg9的人源性抗HBsAg单链抗体/EGFP融合蛋白的基因构建、表达及内化活性的研究

作　者: 薛茜
导　师: 杨安钢；温伟红
学　校: 第四军医大学
专　业: 免疫学
关键词: 乙型肝炎 HBsAg 单链抗体 Arg9
分类号: R392
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 29次
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内容摘要


目的：构建带有转膜结构域Arg9的ScFv14／EGFP融合蛋白基因， 在大肠杆菌中进行表达，纯化，并对纯化产物的亲和活性和内化作用进行分析。 方法：设计引物将Arg9的编码序列分别引入ScFv14基因的5’端、EGFP基因的5’端和3’端，进行PCR扩增。将测序正确的ScFv14基因和R9／ScFv14基因分别与R9／EGFP、EGFP／R9和EGFP基因连接后克隆入原核表达载体pET32a，转化大肠杆菌BL21(DE3)LysS原核诱导表达，用Ni-NTA柱进行缚化后，用间接ELISA方法检测表达产物与HBsAg的亲和活性，并用间接免

全文目录


缩略语表  5-8
中文摘要  8-10
英文摘要  10-12
文献回顾  12-33
  一、单链抗体融合蛋白在基因治疗中的应用  12-21
  二、蛋白转膜结构域的研究进展  21-24
  三、乙型肝炎的基因治疗  24-33
前言  33-35
实验材料  35-42
研究内容及结果  42-72
  一、含Arg9的人源性抗HBsAg单链抗体  42-59
    1. 实验方法  42-51
    2. 实验结果  51-59
  二、含Arg9的人源性抗HBsAg单链抗体/EGFP融合蛋白基因的表达和纯化  59-69
    1. 实验方法  59-64
    2. 实验结果  64-69
  三、含Arg9的人源性抗HBsAg单链抗体/EGFP融合蛋白内化活性的研究  69-72
    1. 实验方法  69-70
    2. 实验结果  70-72
讨论  72-74
小结  74-75
参考文献  75-83
个人简历  83-84
致谢  84

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医学免疫学
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