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PTA1/CD226转基因小鼠胸腺细胞的发育研究

作 者: 方亮
导 师: 金伯泉;缪军
学 校: 第四军医大学
专 业: 免疫学
关键词: 胸腺细胞 小鼠PTA1 转基因小鼠 四环素调控表达系统
分类号: R392
类 型: 硕士论文
年 份: 2006年
下 载: 22次
引 用: 0次
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内容摘要


目的:建立四环素调控的mPTA1/CD226转基因小鼠,对转基因小鼠胸腺细胞的发育进行研究。 方法:①使用pcDNA3-mPTA1和pBI-5载体构建用于四环素调控转基因小鼠制备的pBI-5-mPTA1载体。②采用显微注射的方法将pBI-5-mPTA1载体片段导入B6D1F1小鼠受精卵,对新生小鼠耳成纤维细胞进行体外培养,用含rtTA的pUHD17.1质粒转染细胞,选出荧光素酶表达活性依赖Dox的小鼠。③将阳性小鼠与正常C57BL/6小鼠交配,分别使用mPTA1和荧光素酶(luciferase)引物对子代小鼠的基因组DNA进行PCR检测和鉴定,选取双阳性的Ptet-mPTA1转基因小鼠的F1代,将其继续与C57BL/6小鼠交配,不断得到子代小鼠,直至F4代以后。④将阳性的Ptet-mPTA1转基因小鼠与携带有tTA的EμSR-tTA转基因小鼠杂交,得到子代小鼠,同时使用mPTA1和tTA引物对其基因组DNA进行PCR检测,选取mPTA1和tTA双阳性的小鼠。⑤使用荧光素酶检测试剂盒对杂交的阳性小鼠的不同组织,如胸腺、脾脏、心脏、肾脏等进行

全文目录


缩略语表  5-7
中文摘要  7-10
英文摘要  10-13
前言  13-15
文献回顾  15-29
正文  29-56
  1 四环素调控的PTA1/CD226转基因小鼠的构建  29-37
  2 Ptet-mPTA1/EμSR-tTA双转基因小鼠的建立及表型分析  37-47
  3 PTA1/CD226转基因小鼠胸腺细胞的发育研究  47-56
小结  56-57
参考文献  57-64
个人简历和研究成果  64-65
致谢  65

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医学免疫学
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