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人工辅助脱水在玻璃化冷冻小鼠囊胚中的应用

作　者: 武艳
导　师: 邵小光
学　校: 大连医科大学
专　业: 妇产科学
关键词: 辅助脱水玻璃化冷冻小鼠囊胚
分类号: R714.8
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

背景:自从1983年报道一例4细胞-8细胞胚胎冷冻移植妊娠以来,程序化冷冻已普遍应用。但程序化冷冻耗时较长,浪费人力。玻璃化冷冻技术是指高浓度冷冻保护剂溶液在快速冻结过程中由液态直接变为极其黏稠的非结构的玻璃态,它有效避免了胚胎内及冷冻液的冰晶形成。人们尝试各种方法来提高玻璃化冷冻的存活率和孵出率,包括电子显微镜铜网、冷冻环、开放式拉长麦管。它们主要是通过降低冷冻液的使用量,提高冷冻速度来实现的。玻璃微针刺破透明带人工皱缩是近两年研究的方法,它提高存活率的同时也给胚胎造成了一定的损伤。有报道用直径稍小于囊胚的吸管对扩张期囊胚反复吹打可以使囊胚腔内的水脱出。用此方法进行人工辅助脱水提高了扩张期囊胚的存活率和孵出率。这种方法对扩张期囊胚是实用和有效的,但还没有广泛应用到临床。目的:研究玻璃化冷冻小鼠囊胚及人工辅助脱水在玻璃化冷冻中应用后,胚胎存活及继续发育的能力,寻找玻璃化冷冻的具体方法,探讨玻璃化冷冻方法的机制。为玻璃化冷冻技术应用于临床提供理论依据。方法:超排处理60只昆明小白鼠,出现阴道栓的51只小白鼠取出输卵管及子宫,采集2-4细胞,放入10P液微滴盘进行培养40-72h,在实体显微镜下观察,选择形态良好的囊胚进行分组,共获得250枚囊胚,随机分成3组:对照组、单纯冷冻组、辅助脱水组。对照组:将2-3个发育良好的囊胚移入平衡液中平衡2分钟,再将囊胚移入玻璃化冷冻液中快速清洗(25-30秒内完成),对胚胎不进行冷冻处理,直接进行解冻处理,后继续培养,观察胚胎孵出的能力。后两组均采

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一、正文  5-22
  （一）中文摘要  5-7
  （二）英文摘要  7-10
  （三）前言  10-11
  （四）材料和方法  11-13
  （五）结果  13-14
  （六）讨论  14-17
  （七）结论  17-18
  （八）参考文献  18-20
  （九）附图  20-22
二、文献综述  22-30
  （一）综述  22-28
  （二）参考文献  28-30
三、致谢  30-31
学位论文版权使用授权书  31

人工辅助脱水在玻璃化冷冻小鼠囊胚中的应用

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