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脂筏在CB2受体介导的内源性大麻素AEA抑制大鼠肝星状细胞增殖活性中的作用

作　者: 吴文杰
导　师: 唐望先
学　校: 华中科技大学
专　业: 内科学
关键词: 肝星状细胞内源性大麻素肝纤维化脂筏内源性大麻素受体
分类号: R575.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:探讨脂筏在CB2受体介导的内源性大麻素AEA抑制大鼠肝星状细胞增殖活性中的作用及作用机制。方法:1.采用MTT法检测不同浓度的AEA和MCD对HSC的作用效应;2.构建Cnr2-shRNA转染HSC细胞,采用MTT法检测转染前后不同浓度的AEA和MCD对HSC的作用效应;3.采用Western Blot检测不同浓度内源性大麻素AEA及MCD作用后HSC中p-P38MAPK和p-JNK的表达量;4.采用激光共聚焦法检测HSC上的LRs以及CB2受体的表达;5.采用蔗糖密度梯度离心法提取LRs,Western Blot鉴定LRs并检测LRs中CB2受体的表达结果:1.成功构建Cnr2-ShRNA转染筛选Cnr2-单克隆细胞株, MTT检测发现转染后CB2受体的减少能减弱AEA对HSC细胞增殖的抑制作用,然而用MCD预处理HSC细胞后CB2受体的减少对AEA的效应无明显影响。2.p-P38MAPK和p-JNK的表达与AEA浓度有依赖关系,且可以被MCD部分拮抗。3.CB2受体在HSC膜脂筏和胞浆中均有表达,但用蔗糖密度梯度离心法提取AEA刺激前HSC细胞脂筏,发现未受AEA刺激时脂筏中含有的CB2受体量很少,CB2受体大部分存在于HSC细胞胞浆中。结论:1. CB2受体参与AEA抑制HSC细胞增殖的过程与脂筏相耦连,通过脂筏这个信号平台AEA的刺激可能使CB2受体聚集或增多从而发挥级联放大效应,且这一效应与细胞中p-P38MAPK和p-JNK信号途径的激活有关。2.脂筏和CB2受体介导的信号传导途径可能成为治疗肝纤维化的有效的作用靶点。

全文目录

英文缩略词表  6-8
中文摘要  8-10
ABSTRACT  10-12
前言  12-13
材料与方法  13-27
结果  27-34
讨论  34-37
参考文献  37-40
综述  40-48
  参考文献  45-48
附录  48-51
致谢  51

脂筏在CB2受体介导的内源性大麻素AEA抑制大鼠肝星状细胞增殖活性中的作用

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