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杜仲优良无性系快速微繁殖技术研究

作　者: 唐亮
导　师: 金晓玲
学　校: 中南林业科技大学
专　业: 林木遗传育种
关键词: 杜仲组织培养器官发生胚性愈伤再生植株
分类号: S567.19
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

杜仲是我国特有的经济和药用植物,国家二级保护植物。杜仲的特有成份杜仲胶是一种硬橡胶,耐腐蚀性强,绝缘性能极佳,可塑性好,耐压强度高。同时杜仲作为一种药用植物,具有降压、利尿、改善头晕和失眠等功效。杜仲的主要繁殖方式有有性和无性繁殖两种。目前生产上以种子繁殖为主。但种子发芽率不高,且其实生后代个体间药用有效成分和杜仲胶含量差异显著,不利于新选育出的高药高胶型杜仲优良品种的推广。本研究以采自杜仲优良新品种华仲1号无性系的种子、不同发育时期的胚、成年树冬季休眠的芽及当年萌发的幼嫩芽为外植体,为加快杜仲优良品种的推广,对杜仲的组织培养进行了研究。以杜仲的成熟胚为外植体,通过直接和间接器官发生途径获得了杜仲再生植株,建立了杜仲组培快速繁殖体系；并以杜仲的未成熟胚为外植体,获得了胚性愈伤组织。着重研究了各阶段的培养基配方,运用正交实验设计等方法,使用spss软件进行数据分析,结果如下：1.直接器官发生途径：以杜仲的成熟胚为外植体,通过直接器官发生途径获得了杜仲的再生植株,诱导丛生芽时比较合适的培养基配方为：MS+BA(0.5 mg/L-2.0mg/L),诱导率可达50%。丛生芽的增殖时比较合适的培养基配方为：MS+BA2.0mg/L,增殖系数可达162.5%。2.间接器官发生途径：以杜仲的成熟胚为外植体,通过间接器官发生途径获得了杜仲再生植株,愈伤组织诱导比较合适的培养基配方为：MS+BA(2.0mg/L)+NAA (0.1-2.5 mg/L),愈伤组织诱导率为70%。愈伤组织增殖合适的培养基配方为：MS+BA(2.0mg/L)+NAA (0.5-2.5 mg/L),增殖系数达180%。丛生芽诱导比较合适的培养基配方为：MS+BA 2.0mg/L,诱导率达80%。3.胚性愈伤组织：以杜仲的未成熟胚为外植体,在胚性愈伤的诱导和增殖时,效果最好的培养基配方是：MS+BA 1.0mg/L+2,4-D 2.0mg/L。胚性愈伤组织成熟时,效果最好的培养基配方是：MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。4.生根、炼苗和移栽：生根阶段比较合适的培养基配方为：1/2MS,生根率可达80%。移栽基质为等量混合的泥炭和珍珠岩,移栽成活率达到67.7%。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-9
1 文献综述  9-23
  1.1 杜仲的生物学特性及应用  9-13
    1.1.1 生物学特性  9-10
    1.1.2 杜仲的应用  10-12
    1.1.3 杜仲的繁殖技术  12-13
    1.1.4 其它方面  13
  1.2 组织培养技术研究进展  13-17
    1.2.1 林木组织培养技术研究进展  14-15
    1.2.2 体细胞胚的发生途径  15
    1.2.3 体细胞胚发生的特点与意义  15-17
  1.3 杜仲组织培养的研究进展  17-23
    1.3.1 杜仲组织培养的外植体选择和分化途径  19-20
    1.3.2 杜仲组织培养的基本培养基  20-21
    1.3.3 杜仲组织培养的激素及附加营养物  21-22
    1.3.4 杜仲组织培养及植株再生中存在的问题  22
    1.3.5 小结与展望  22-23
2 研究意义、研究内容和技术路线  23-26
  2.1 本研究的项目依托和研究意义  23-24
  2.2 主要研究内容  24-25
    2.2.1 直接器官发生途径  24
    2.2.2 间接器官发生途径  24
    2.2.3 胚性愈伤组织  24-25
  2.3 主要技术路线  25-26
3 材料和方法  26-33
  3.1 材料  26
    3.1.1 杜仲组织培养材料  26
    3.1.2 实验中使用到的主要仪器  26
  3.2 方法  26-31
    3.2.1 组织培养实验方法  26-31
  3.3 实验参数的计量与测定  31-33
    3.3.1 污染率  31
    3.3.2 丛生芽诱导率  31-32
    3.3.3 愈伤组织诱导率  32
    3.3.4 丛生芽增殖系数  32
    3.3.5 愈伤组织增殖系数  32
    3.3.6 生根率  32
    3.3.7 移栽成活率  32-33
4 结果与分析  33-56
  4.1 直接器官发生途径  33-43
    4.1.1 以胚为外植体的丛生芽的诱导  33-37
    4.1.2 以带芽茎段为外植体的丛生芽的诱导  37-38
    4.1.3 以胚为外植体的丛生芽的增殖  38-40
    4.1.4 以胚为外植体的丛生芽的生根  40-43
    4.1.5 生根苗的炼苗和移栽  43
  4.2 间接器官发生途径  43-50
    4.2.1 愈伤组织的诱导  43-47
    4.2.2 愈伤组织的增殖  47-49
    4.2.3 丛生芽的诱导  49-50
  4.3 胚性愈伤组织  50-56
    4.3.1 胚性愈伤组织的诱导  50-52
    4.3.2 胚性愈伤组织的增殖  52
    4.3.3 胚性愈伤组织的成熟  52-53
    4.3.4 胚性愈伤组织的萌发  53-55
    4.3.5 小结  55-56
5 结论与讨论  56-61
  5.1 结论  56-57
    5.1.1 直接器官发生途径  56
    5.1.2 间接器官发生途径  56-57
    5.1.3 胚性愈伤组织  57
  5.2 讨论  57-61
    5.2.1 实验中遇到的问题及采取的措施  57-60
    5.2.2 培养基  60
    5.2.3 植物激素  60
    5.2.4 活性炭  60-61
参考文献  61-67
附录A  67-73
附录B  73-74
附录C  74-75
致谢  75

杜仲优良无性系快速微繁殖技术研究

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