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HIV假病毒的构建及抗HIV药物SPR、ELRSE筛选方法的建立
作 者: 谢桂煌
导 师: 陈朝银
学 校: 昆明理工大学
专 业: 生物化工
关键词: HIV 假病毒 SPR 药物筛选
分类号: R91
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 75次
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内容摘要
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随着人类对艾滋病致病机制的深入研究,越来越多新的抗HIV药物进入临床试验阶段,但大量抗HIV药物的使用也导致了耐药性问题的出现。因此,建立高通量快速的抗HIV药物初步筛选平台对于研究新的抗HIV药物非常重要。针对传统抗HIV药物细胞水平筛选模型对实验室条件要求高,并且具有较高危险性等缺点,本论文通过构建HIV假病毒和应用体外药物靶向筛选方法来研究抗HIV药物的初步筛选,以建立快速方便且危险性较低抗HIV药物筛选和评价系统,用于新的抗HIV药物的开发。主要的研究内容如下:(1)构建HIV假病毒,为进一步建立基于HIV假病毒的抗HIV药物筛选细胞模型提供基础。实验过程中成功构建出了具有感染活性的HIV假病毒。但由于其感染活性较低,尚不能应用于抗HIV药物的筛选。需要进一步对假病毒构建的实验过程进行优化,以提高假病毒的感染活性,(2)利用SPR技术,建立抗HIV药物的筛选和分析方法,获得不同样品对HIV包膜蛋白rgp120 MN结合能力和平衡解离常数等数据,得出三个多糖样品中Za24-70-5-1002#与rgp120 MN的结合作用非常明显。动力学/亲和分析结果显示,Za24-70-5-1002#与rgp120 MN之间平衡解离常数KD(M)为1.172E-13M。两者之间具有很高的亲和力,因此Za24-70-5-10023可能具有较高的抗HIV活性,有必要对其药理作用进行进一步的研究。Za48-70-×100 J与rgp120 MN之间也具有比较好的亲和性,它们之间的平衡解离常数KD(M)为5.752E-6M。(3)应用ELISA法建立抗HIV药物初步筛选方法,以细胞表面受体CD4作为研究靶位,研究多糖样品对gp120与CD4结合的抑制作用。通过实验测得13个不同样品对gp120与CD4结合的抑制效果,计算出不同样品对gp120与CD4结合抑制的IC5o值,得到不同样品的IC5o值在1.150μg/mL之间。为进一步的药物筛选和分析提供依据。
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全文目录
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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药物基础科学
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