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小鼠雌激素受体α重组腺病毒感染神经细胞及小鼠中枢神经系统的鉴定
作 者: 娄磊
导 师: 王建怡
学 校: 遵义医学院
专 业: 儿科学
关键词: 重组腺病毒 神经细胞 雌激素受体α C57BL/6小鼠
分类号: R363
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 3次
引 用: 0次
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内容摘要
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目的:用小鼠雌激素受体a(Estrogen receptorα, Erα)重组腺病毒感染神经细胞及小鼠中枢神经系统(central nervous system CNS),为研究Era在CNS发育中的作用及其与一些神经系统疾病的关系奠定基础。方法:无血清培养C57BL/6小鼠神经细胞,免疫组化方法鉴定神经元的纯度。腺病毒Adeno-GFP感染原代培养的神经细胞,流式细胞仪(Flow cytometry, FCM)检测细胞感染率及凋亡率,用于判断腺病毒的最佳感染复数(Multiplicity of infection, MOI)。应用最佳MOI重组腺病毒感染神经细胞,实时定量PCR和western blot分别检测受感染的神经细胞中Era mRNA和蛋白的表达。应用立体定位方法体内感染CNS,观察荧光表达。结果:成功原代培养神经细胞,神经元纯度达90%以上。MOI=100可作为Era重组腺病毒感染神经细胞的最佳MOI, FCM检测其感染效率为84.42±4.47%,凋亡率为3.62±0.72%。Era重组腺病毒可成功感染神经细胞并能上调ErαmRNA及蛋白的表达,亦可以成功感染CNS。结论:Era重组腺病毒能成功感染神经细胞及CNS并能上调ErαmRNA和蛋白表达。
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全文目录
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英汉缩略词对照表 5-7摘要 7-8Abstract 8-9前言 9-10材料 10-13方法 13-18结果 18-25讨论 25-27参考文献 27-31文献综述 31-36 参考文献 34-36致谢 36-37作者简介 37
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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 病理学 > 病理生理学
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