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胎盘间充质干细胞体外分离培养及向成骨细胞和神经细胞分化的研究

作　者: 张红艳
导　师: 杨乃龙
学　校: 青岛大学
专　业: 内科学
关键词: 人胎盘间充质干细胞 Transwell共培养成骨细胞神经细胞
分类号: R329
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：人足月胎盘间充质干细胞(hPMSCs)在体外进行分离纯化并对其生物学特征进行研究,建立共培养体系(分别与成骨细胞和神经细胞),观察共培养体系对hPMSCs分化为成骨细胞和神经细胞的影响。方法：采用胶原酶消化法从人胎盘中分离纯化间充质干细胞(MSCs);通过测细胞生长曲线、CD分子、细胞超微结构及成骨能力对hPMSCs进行鉴定；Transwell双层培养皿的底层接种成骨细胞或神经细胞,上层种hPMSCs接,加入高糖DMEM (10%胎牛血清),对照组上下层均接种hPMSCs。诱导后的成骨细胞用碱性磷酸酶及茜素红染色进行鉴定,诱导后的神经细胞用NSE进行鉴定。结果：培养14d后大量细胞贴壁并呈成纤维状生长；强表达CD44,CD29,不表达CD34,CD45;诱导后可以向成骨细胞分化；与成骨细胞的共培养组碱性磷酸酶活性染色阳性,对照组碱性磷酸酶活性染色成阴性。与神经细胞共培养的细胞可见丝状突起,成细长型,NSE染色为阳性。结论：MSCs同样可见于人足月胎盘中,其生物学特性与其他来源的MSCs相似,成骨细胞及神经细胞生长过程中提供的微环境可以诱导hPMSCs向成骨细胞及神经细胞分化。

全文目录

摘要  2-3
Abstract  3-5
引言  5-6
第一章材料与方法  6-10
  1.1 实验试剂  6
  1.2 实验仪器  6-7
  1.3 实验步骤  7-10
第二章结果  10-20
  2.1 hPMSCs分离、纯化与扩增培养  10-11
  2.2 hPMSCs细胞表面标志物表达  11-13
  2.3 hPMSCs的超微结构  13
  2.4 hPMSCs生长曲线的绘制  13-14
  2.5 hPMSCs向成骨细胞诱导的结果及鉴定  14-15
  2.6 原代成骨细胞及神经细胞的形态观察及鉴定  15-17
  2.7 共培养后细胞的形态变化及鉴定  17-20
第三章讨论  20-23
结论  23-24
参考文献  24-29
综述  29-40
  参考文献  35-40
攻读学位期间的研究成果  40-41
致谢  41-42

胎盘间充质干细胞体外分离培养及向成骨细胞和神经细胞分化的研究

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