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缬沙坦对人肾小球系膜细胞糖基化终产物受体表达的影响

作　者: 钟林娜
导　师: 黄国良；游捷
学　校: 福建医科大学
专　业: 内科学
关键词: 糖尿病肾病缬沙坦糖基化终产物受体 NADPH氧化酶氧化应激
分类号: R692
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:观察缬沙坦对糖基化终产物(Advanced glycation end products, AGEs)刺激下人肾小球系膜细胞氧化应激水平及糖基化终产物受体(Receptor for advanced glycation end products ,RAGE)表达的作用,探讨缬沙坦的抗氧化作用对RAGE表达的影响。方法:1、体外培养HMC,用糖基化小牛血清(AGE-BSA)、未经修饰的BSA、第三丁基过氧化氢(t-BHP)分别刺激24h、48h,检测细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的主要成分H2O2以反应氧化应激水平,同时检测RAGE表达量,其中H2O2用二氯氢化荧光素(DCFH-DA)标记,流式细胞术检测,RAGE的mRNA用RT-PCR方法检测,蛋白表达量用细胞免疫化学检测,观察氧化应激对RAGE表达的影响。2、不同浓度缬沙坦作用于AGE-BSA刺激的系膜细胞12h、24h、48h,用同样方法检测RAGE和H2O2的量,并用RT-PCR方法检测NADPH氧化酶亚基p22phox、p47 phox的mRNA,观察缬沙坦对AGE-BSA刺激下系膜细胞内RAGE、氧化应激及NADPH氧化酶表达的影响。结果:1、终浓度为200mg/L的AGE-BSA和t-BHP分别作用于HMC 24h、48 h,人肾小球系膜细胞上RAGE的mRNA及蛋白表达量较BSA组明显增多,H2O2的产量也较BSA组升高,随着时间延长,升高愈加明显;而AGE-BSA和t-BHP分别与N-乙酰半胱氨酸(NAC)共同干预人肾小球系膜细胞后,细胞内H2O2的产量较AGE-BSA和t-BHP单独干预细胞明显减少,RAGE的mRNA和蛋白表达量也显著降低。2、缬沙坦能够以浓度依赖关系抑制不同作用时间下AGE-BSA引起的系膜细胞内RAGE、H2O2和NADPH氧化酶亚基p47phox mRNA表达;而在3个检测时间点,缬沙坦对NADPH氧化酶亚基p22phox的mRNA表达无明显影响。结论:1、AGE-BSA可提高人肾小球系膜细胞内氧化应激水平,而氧化应激可促进系膜细胞上RAGE的表达。2、缬沙坦能够以浓度依赖关系抑制AGE-BSA引起的系膜细胞内RAGE表达和氧化应激水平的升高,缬沙坦可能通过抗氧化作用减少RAGE生成。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
前言  8-10
第一部分氧化应激对人肾小球系膜细胞上RAGE 表达的影响  10-27
  引言  10
  材料与方法  10-18
  结果  18-25
  讨论  25-27
第二部分缬沙坦对人肾小球系膜细胞上RAGE 表达的影响  27-49
  引言  27-28
  材料与方法  28-32
  结果  32-44
  讨论  44-49
结论  49-50
参考文献  50-55
致谢  55-56
综述  56-61

缬沙坦对人肾小球系膜细胞糖基化终产物受体表达的影响

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