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长角血蜱卵黄发生的激素调控

作　者: 杨晓红
导　师: 刘敬泽
学　校: 河北师范大学
专　业: 动物学
关键词: 长角血蜱卵黄蛋白卵黄原蛋白卵黄发生脂肪体血淋巴激素
分类号: Q418
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

蜱类是广泛分布的专性吸血的外寄生物,由其传播的人畜疾病非常多,对人类及畜牧业发展危害极大。蜱类的繁殖力极强,卵黄发生及其激素调控,是该领域研究的热点方向,为蜱类生物防治提供了坚实的理论基础。本研究以长角血蜱Haemaphysalis longicornis为研究对象,研究了其卵巢发育过程中形态及蛋白质含量变化,并利用本实验室制备的卵黄蛋白单克隆抗体,应用ELISA技术,研究了20E (20-hydroxyecdysone)和JH III(juvenile hormone III)两种激素对长角血蜱卵黄发生过程的调控作用。主要结果如下:体视显微镜下观察卵巢发育特征,表明随着吸血的进行,卵巢也随之发生显著的变化。交配期卵巢非常细,呈白色。饱血后卵巢变粗变长。饱血后3～4天,卵细胞快速发育,卵巢增大,卵母细胞呈棕红色,卵黄粒出现。饱血后5天开始产卵,卵巢外观与饱血后4天相似,但是在卵巢腔和输卵管中可见正在排出的卵细胞。产卵后8天,卵巢开始萎缩,变细变白,只剩下很少的未排出的卵细胞。同时,卵巢重量也发生明显变化,交配期卵巢非常轻(0.867mg),到产卵当天卵巢达到最大重量30.540mg,之后开始下降,到产卵后8天卵巢重量降到最低3.667mg。相应地,到产卵后2天卵巢重量占体重比例达到最大值0.225%,之后慢慢下降,产卵后8天降到0.041%。交配期卵巢总蛋白含量很低(33.504mg),到产卵当天达到最大值4069.000mg,到产卵后10天蛋白含量降到72.455mg。对吸血6天未交配雌蜱注射20E和JH III,20E和JH III的最大注射剂量为10μg/tick。向饱血当天雌蜱注射20E,最大注射剂量为10μg/g bw,局部点滴JH III,最大施加剂量为100μg/g bw。向半饱血未交配雌蜱注射激素4天后,解剖虫体,体视镜下观察卵巢形态,测量卵细胞长度,称量卵巢重量,并应用ELISA法检测血淋巴、卵巢、脂肪体组织中卵黄原蛋白和卵黄蛋白含量。研究结果表明,注射剂量为10μg/tick 20E和10μg/tick JH III的蜱于注射后4天全部死亡。注射剂量为2μg/tick 20E蜱卵巢被充满了卵黄颗粒的卵细胞充满,卵巢体积较大,整体呈现棕黄色,而注射对照卵巢体积极小,呈白色半透明状。20E注射剂量为2μg/tick的蜱卵巢重量占体重比例,脂肪体、血淋巴和卵巢中卵黄原蛋白白含量和卵黄原蛋白含量与对照组相比较显著增高。而JH III对半饱血未交配长角血蜱卵巢重量、脂肪体、血淋巴和卵巢中卵黄含量和卵黄原蛋白含量无影响。对饱血当天雌蜱注射20E和局部施加JH III,4天后称量其卵巢重量,ELISA法检测脂肪体、血淋巴、卵巢组织中卵黄原蛋白和卵黄蛋白含量,结果为激素施加组与对照组相比较无显著差异。因此得出结论,20E显著促进了半饱血未交配雌蜱的卵巢发育,刺激了卵黄发生过程,但是JH III对半饱血未交配雌蜱卵黄发生无影响。20E和JH III对饱血期长角血蜱卵黄发生均无影响。

全文目录

摘要  3-5
Abstract  5-9
第一章综述：蜱类生殖和激素的作用  9-13
  1 蜱类生殖  9
  2 蜱类的卵黄发生  9-10
  3 激素的作用  10-13
第二章长角血蜱卵巢发育动态及蛋白含量变化  13-22
  1 材料与方法  13-14
    1.1 长角血蜱的采集与喂养  13
    1.2 长角血蜱各时期卵巢的剖取及称重  13
    1.3 卵巢显微照片的采集  13
    1.4 不同发育期卵巢提取物的制备  13-14
    1.5 各发育期卵巢蛋白质含量测定  14
    1.6 主要溶液配制  14
    1.7 数据结果分析  14
  2 结果  14-19
    2.1 长角血蜱不同发育期卵巢的形态变化  14-15
    2.2 各发育期卵巢重量变化  15-17
    2.3 各发育期卵巢重量占体重比例的变化  17-18
    2.4 不同发育期卵巢蛋白质含量变化  18-19
  3 讨论  19-22
第三章 20E 和JH 对长角血蜱卵黄发生的调控作用  22-41
  1 20E 和JH III 对吸血期未交配长角血蜱卵黄发生的调控作用  22-33
    1.1 材料方法  22-24
    1.2 结果  24-33
  2 20E 和JH III 对饱血期长角血蜱卵黄发生的调控作用  33-37
    2.1 材料方法  33-34
    2.2 结果  34-37
  3 讨论  37-41
    3.1 蜕皮激素对蜱类生殖的影响  37-38
    3.2 保幼激素对蜱类生殖的影响  38-39
    3.3 蜱类生殖调控  39-41
参考文献  41-46
致谢  46-47
个人简历  47

长角血蜱卵黄发生的激素调控

内容摘要

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