学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

补骨脂抗氧化与抗癌活性成分的研究

作　者: 郭江宁
导　师: 翁新楚；毕开顺
学　校: 沈阳药科大学
专　业: 药物分析学
关键词: 补骨脂 OSI方法:抗氧化活性天然抗氧化剂的筛选抗癌作用
分类号: R284
类　型: 博士论文
年　份: 2004年
下　载: 741次
引　用: 10次
阅　读: 论文下载

内容摘要

本文采用OSI方法，选择常见中药为主要研究对象，进行天然抗氧化剂的筛选。抗氧化活性的强弱，主要以加入抗氧化剂前后，底物氧化诱导期（IP）长短为指标，通常用抗氧化保护系数（Pf）来表示。考察它们对猪油抗氧化活性的影响，以期获得抗氧化活性较强的中药。在所研究的65种中药中，对底物猪油有抗氧化作用的中药有9种，其由强至弱的顺序依次为：迷迭香、补骨脂、肉豆蔻、甘草、五倍子、诃子、丹参、丁香（Pf＞2）。其中补骨脂的抗氧化活性强于合成抗氧化剂BHA、BHT和天然抗氧化剂(α-tocopherol，是常用的中药。由于补骨脂在抗氧化方面的报道甚少，故本文对其进行了深入研究。本文系统地查阅了补骨脂化学成分及其生物活性研究的文献，在进行文献综述的基础上，采用抗氧化活性跟踪手段，通过柱色谱方法对具有抗氧化作用的超临界CO₂提取物、石油醚提取物和氯仿提取物进行活性成分的分离纯化工作，结合理化性质和波谱分析，从补骨脂中分离并鉴定了6个单体化合物，它们是：补骨脂酚（bakuchiol）、异补骨脂素（isopsoralen）、补骨脂素（psoralen）、补骨脂双氢黄酮（corylifolin）、补骨脂异黄酮（corylin）、补骨脂定（psoralidin）；同时采用OSI方法测定了6个单体化合物的抗氧化活性，并与BHT和α-tocopherol比较，初步探讨了抗氧化机理。结果表明，补骨脂酚、补骨脂双氢黄酮、补骨脂异黄酮、补骨脂定具有较强的抗氧化活性，尤其是补骨脂定在0.02％和0.04％浓度时的抗氧化活性强于同浓度的BHT。而补骨脂素和异补骨脂素在0.02％和0.04％浓度时无明显的抗氧化活性。其抗氧化活性的强弱为：补骨脂定＞BHT＞α-tocopherol＞补骨脂酚＞补骨脂双氢黄酮＞补骨脂异黄酮＞补骨脂素～异补骨脂素。这些结果说明：抗氧化作用除了与化合物中酚羟基的数目有关外，更重要的是与酚羟基在化合物中的位置有关。沈阳药科大学博士学位论文摘要本文首次在动物体内研究了补骨脂的抗氧化和抗衰老作用，并对其进行了系统研究。实验测定了补骨脂提取物对小鼠血清中超氧化物岐化酶（SOD）活力与丙二醛（MDA）含量的影响;以a一toc叩herol为阳性对照，观察补骨脂对小鼠常压缺氧、游泳时间、高温环境下存活时间和对果蝇寿命的影响。结果表明，补骨脂不同提取物三个剂量组（29·Kg一，、19·Kg一，、0.59·K岁）均能提高小鼠血清中SOD活力，降低 MDA含量，并可显著延长常压缺氧时间、游泳时间、耐高温时间，延长果蝇的平均寿命、半数死亡时间和最高寿命。本文研究了补骨脂中活性成分在体外的抗癌作用，同时考察了溶剂乙醇和立甲基亚矶对细胞增殖的影响，并通过MTT试验对其抑制BGC一823、U937、Du一145、A一549、Bel一7402和Eca一1 09肿瘤细胞的增值进行了深入研究。结果发现，在细胞培养液中加入补骨脂素和异补骨脂素48小时后，肿瘤细胞增值各不相同，对上述肿瘤细胞IC5o依次为5.820林g/mL、32.64林g/mL、29.83协g/mL、48.81林g/mL、23 .85林g/mL、>100卜g/mL;>100林g/mL、59.53林g/mL、69.19卜g/mL、>100林g/mL、39.74林g/mL、>100林创mL。它们对不同肿瘤细胞的抑制作用分别为BGC一823>Bel一7402>Du一145>U937>A一549>Eea一109和Bel一7402>U937>Du一145>A一549一Eca一109一BGC一823。表明两种化合物对肿瘤细胞株抑制作用具有一定的选择性。为进一步验证体外实验结果，本文选择体外抑瘤活性结果突出的胃癌为模型，以5一Fu和卡莫氟为阳性对照药，进一步研究了补骨脂素和异补骨脂素对3，4-苯并花诱导的前胃癌小鼠模型的体内抗癌作用，通过组织切片观察抗癌作用。实验结果表明，补骨脂素120 mg·Kg一‘剂量组体内抑瘤有显著性差异，补骨脂素60 mg .Kg一，剂量组和异补骨脂素36 mg .Kg一’剂量组均具有不同程度的抗癌作用。同时，小鼠的自然体重增加和各脏器占体重之比无明显影响，可以认为在本实验剂量范围内，上述药物均对小鼠无明显毒性反应。组织切片观察结果显示补骨脂素和异补骨脂素实验组小鼠前胃生长的乳头状瘤较空白对照组小，说明它们在体内也具有一定的抗癌作用。本文对补骨脂抗氧化和抗肿瘤活性进行了较系统的研究。结果表明补骨脂具有较强的抗氧化活性，其中的活性成分在动物体内与体外实验中也证明具有一定沈阳药科大学博士学位论文摘要的抗癌作用。这对于寻找新型高效、低毒的天然抗氧化剂和进一步系统研究和开发利用中药补骨脂，充分肯定其药用价值提供了一定的科学依据。

全文目录

摘要  8-11
ABSTRACT  11-14
缩写  14-16
第一章前言  16-26
  1.1 抗氧化剂与自由基概述  16-20
    1.1.1 自由基  16-17
    1.1.2 体内自由基产生机理  17
    1.1.3 自由基对生物体损伤的分子机理  17-18
    1.1.4 自由基和疾病  18-19
    1.1.5 抗氧化剂  19-20
  1.2 抗肿瘤的研究概况  20-22
    1.2.1 抗肿瘤中草药的研究进展  21-22
    1.2.2 抗肿瘤中草药的发展趋势  22
  1.3 补骨脂研究概况  22-24
    1.3.1 补骨脂化学成分研究  23
    1.3.2 补骨脂药理作用和临床作用研究  23-24
  1.4 本研究立题依据  24-26
第二章天然抗氧化剂的中药筛选  26-32
  2.1 概述  26
  2.2 实验材料  26-27
  2.3 天然抗氧化剂的筛选  27-32
    2.3.1 试样的预处理  27
    2.3.2 OSI法测定65种中药对猪油诱导期的影响  27-32
第三章补骨脂抗氧化活性成分的提取与分离  32-55
  3.1 概述  32
  3.2 实验材料  32-34
  3.3 补骨脂抗氧化活性的初步研究  34-41
    3.3.1 中药补骨脂粉末抗氧化活性的测定  34-35
    3.3.2 补骨脂抗氧化部位提取工艺研究  35-41
  3.4 补骨脂中抗氧化活性成分的提取与分离  41-48
    3.4.1 超临界CO_2萃取物中抗氧化成分的分离纯化  42-43
    3.4.2 石油醚提取物抗氧化成分的分离纯化  43-44
    3.4.3 氯肪提取物抗氧化成分的分离纯化  44
    3.4.4 化合物的结构鉴定  44-48
  3.5 抗氧化活性的测定  48-49
  3.6 抗氧化机制的探讨  49-55
第四章补骨脂体内抗氧化与抗衰老研究  55-65
  4.1 概述  55
  4.2 实验材料  55-56
  4.3 清学检测抗氧化相关酶与代谢产物  56-58
  4.4 抗应激试验  58-61
    4.4.1 对小鼠常压耐缺氧的影响  58-59
    4.4.2 对小鼠游泳时间的影响  59-60
    4.4.3 对小鼠耐高温能力的影响  60-61
  4.5 果蝇生存实验  61-63
    4.5.1 培养基的配制  61
    4.5.2 实验设计方案  61-62
    4.5.3 实验方法  62-63
  4.6 讨论  63-65
第五章补骨脂中抗癌活性成分的研究  65-75
  5.1 概述  65
  5.2 实验材料  65-67
  5.3 体外抗癌实验研究  67-72
    5.3.1 溶液的配制  67-68
    5.3.2 肿瘤细胞的体外培养  68-69
    5.3.3 溶剂对肿瘤细胞增殖的影响  69-70
    5.3.4 MTT法测定肿瘤细胞的增殖作用  70
    5.3.5 细胞凋亡的光学显微镜观察  70-72
  5.4 体内抗癌实验研究  72-75
    5.4.1 溶液的制备  72
    5.4.2 对小鼠前胃癌的影响  72-75
第六章结果与讨论  75-78
参考文献  78-89
附录  89-125
图例说明  125-126
致谢  126-127
个人简历  127

补骨脂抗氧化与抗癌活性成分的研究

内容摘要

全文目录

相似论文