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中药植物雌激素对人晶状体上皮细胞雌激素受体表达的影响及其信号转导机制的研究

作　者: 张可丽
导　师: 祁明信；黄秀榕
学　校: 福建中医学院
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 人晶状体上皮细胞 雌激素受体 过氧化氢 蜕皮甾酮 异补骨脂素 氧化损伤 信号传递 白内障 防治
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


研究目的本课题拟研究人晶状体上皮细胞（Lens epithelial cell,LEC）雌激素受体表达的情况及中药植物雌激素异补骨脂素（Isopsoralen）和蜕皮甾酮（Ecdysterone）对受体表达的影响,并探讨其细胞信号转导机制,为中药植物雌激素防治老年性白内障提供科学的实验依据。研究方法本研究采用ECR和ISR与人晶状体上皮细胞（HLEC）共同孵育,以雌二醇（β-Estradiol,E2）作为阳性对照,再用H2O2对HLEC造成氧化损伤后,进行下列研究。1.采用流式细胞术（Flow Cytometer,FCM）检测不同浓度的ECR和ISR作用于经H2O2处理的HLEC的雌激素受体a（estrogen receptor a,ERa）蛋白的表达变化,探讨ECR和ISR对HLEC的抗氧化损伤作用及机制;2.采用流式细胞术（Flow Cytometer,FCM）检测不同浓度的ECR和ISR作用于经H2O2处理的HLEC的雌激素受体β（estrogen receptorβ,ERβ）蛋白的表达变化,探讨ECR和ISR对HLEC的抗氧化损伤作用及机制;3.采用流式细胞术（Flow Cytometer,FCM）检测一定浓度的ECR和ISR作用于经H2O2处理的HLEC的磷酸化的ERK蛋白的表达变化,探讨ECR和ISR对HLEC的抗氧化损伤的细胞信号转导机制。研究结果一、FCM检测经H2O2处理的HLEC上ERa蛋白的表达1.正常HLEC内存在ERa的表达;2.H2O2组HLEC内ERa表达明显下降,与空白组比较有非常显著性差异（p＜0.01）;3.E2、ECR、ISR高中低浓度组的HLEC内ERa表达明显升高,与H2O2组比较有非常显著性的差异（p＜0.01）;且随ECR和ISR浓度的增高HLEC内ERa表达逐渐升高,并呈明显的浓度依赖关系。二、FCM检测经H2O2处理的HLEC上ERβ蛋白的表达1.正常HLEC内存在ERβ的表达;2.H2O2组HIEC内ERβ表达明显下降,与空白组比较有非常显著性差异（p＜0.01）;3.E2、ECR、ISR高中低浓度组的HLEC内ERβ表达明显升高,与H2O2组比较有非常显著性的差异（p＜0.01）;且随ECR和ISR浓度的增高HLEC内ERβ表达逐渐升高,并呈明显的浓度依赖关系。三、FCM检测经H2O2处理的HLEC上不同时段的磷酸化的ERK蛋白表达1、正常HLEC内存在p-ERK的表达,并在6h时出现峰值。2、H2O2作用于HLEC后,HLEC内p-ERK的表达量随作用时间延长呈逐渐下降趋势,在0.5h时其值显著高于正常组;H2O2用1h时后,其值显著低于正常组,各时段值与空白组比较有显著性差异（p＜0.01）;3、E2作用于HLEC以后,HLEC内p-ERK的表达随作用时间延长呈逐渐升高,6h后各时段p-ERK表达量显著高于同时段H2O2组（p＜0.01）,且在6h时出现峰值;4、中浓度ECR作用于HLEC 3h以后,各时段p-ERK表达量较同时段H2O2组显著升高（p＜0.01）,且在12h时出现峰值;5、中浓度ISR作用于HLEC1h以后,各时段p-ERK表达量较同时段H2O2组显著升高（p＜0.01）,且在1h时出现峰值。研究结论1.正常HLEC上存在ERα、ERβ、p-ERK表达。2.H2O2能下调HLEC的ERα、ERβ表达。3.E2、ECR、ISR能上调经H2O2处理的HLEC的ERα、ERβ表达,并呈明显的浓度依赖关系:E2、ECR、ISR的抗氧化损伤作用,可能是通过上调经HLEC的ERα、ERβ表达实现的。4.经H2O2处理的p-ERK表达量随时间的延长而减少。5.E2、ECR、ISR各组p-ERK表达量分别在作用6h、12h、1h时达到高峰。6.E2、ECR、ISR的抗氧化损伤作用,可能与ERK/MAPK信号通路有关。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
前言  8-11
第一章 蜕皮甾酮和异补骨脂素对氧化损伤的人晶状体上皮细胞雌激素受体α表达的影响  11-26
  1.1 材料与方法  11-15
  1.2 结果  15-23
  1.3 讨论  23-25
  1.4 小结  25-26
第二章 蜕皮甾酮和异补骨脂素对氧化损伤的人晶状体上皮细胞雌激素受体β表达的影响  26-35
  2.1 材料与方法  26-27
  2.2 结果  27-34
  2.3 讨论  34
  2.4 小结  34-35
第三章 蜕皮甾酮和异补骨脂素对抗氧化损伤  35-56
  3.1 材料与方法  35-37
  3.2 结果  37-54
  3.3 讨论  54-55
  3.4 小结  55-56
总结  56-58
参考文献  58-60
致谢  60-61
文献综述  61-65
作者简历  65

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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