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广西产何首乌有效成分分离纯化及生物活性研究

作　者: 赵芳
导　师: 侯华新
学　校: 广西医科大学
专　业: 药物化学
关键词: 制首乌分离纯化人脐静脉血管内皮细胞 MTT比色法 HE染色法生首乌无细胞毒流份 HDAC抑制剂鼻咽癌细胞
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

目的:分离纯化制首乌醇提物的正丁醇萃取物;并初步探讨各流份对人脐静脉血管内皮细胞增殖的影响。方法:采用聚酰胺柱色谱分离纯化何首乌醇提取物的正丁醇萃取物;应用IR、1~H-N1VIR、13~C-NMR对分离出的化合物进行结构鉴定;MTT比色法检测何首乌提取物正丁醇萃取物聚酰胺柱层析流份对人脐静脉血管内皮细胞生长的作用;HE染色法观察其流份对人脐静脉血管内皮细胞作用的形态学变化。结果:利用聚酰胺柱色谱技术,经过乙醇水梯度洗脱,分离获得5种流份,流份A经硅胶柱层析分离得化合物Ⅰ(结构待定)。经聚酰胺柱层析洗脱的五种流份对人脐静脉血管内皮细胞增殖具有不同的作用,其中E流份随着浓度的增加,对人脐静脉血管内皮细胞增殖具有促进作用,显微镜下观察到细胞的数量及分裂相增多。C和D流份对细胞的增殖影响不大,而B流份对血管内皮细胞具有抑制生长作用,细胞的数量减少,核固缩。结论:聚酰胺柱色谱对何首乌提取物的多酚羟基类物质具有一定的分离效果;制首乌提取物聚酰胺柱层析流份中含有促人脐静脉血管内皮细胞生长的活性物质。目的:分离纯化生首乌水提物的乙酸乙酯萃取物;并初步探讨无细胞毒性的流份对组蛋白去乙酰化酶活性的影响。方法:分别采用大孔吸附树脂D101柱、羟丙基葡聚糖凝胶柱、重结晶等方法分离纯化生首乌水提取物的乙酸乙酯萃取物;通过MTT法观察流份的细胞毒性;酶联吸附免疫法(ELISA)测定无细胞毒性的流份对人组蛋白去乙酰化酶(HDAC)活性的影响。结果:利用大孔树脂D101柱色谱技术,经过不同浓度的乙醇梯度洗脱,分离获得A、B、C、D、E、F6种流份。再将C流份过羟丙基葡聚糖凝胶柱,分离得到4种流份C1、C2、C3、C4。其中C1重结晶得到1个化合物,经红外核磁共振光谱初步鉴定为儿茶素。选用无细胞毒性的流份C、C2、C3进行抑制组蛋白去乙酰化酶活性研究,其中流份C2、C3随着浓度的增加,对鼻咽癌CNE-1细胞的组蛋白去乙酰化酶活性具有一定的抑制作用,而未经羟丙基葡聚糖凝胶柱分离的C流份的抑制能力相对较弱。结论:生首乌水提物的乙酸乙酯萃取物中含有儿茶素,同时可能含有组蛋白去乙酰化酶抑制剂;有必要对何首乌进一步开发利用。

全文目录

第一篇何首乌概况  6-28
  第一节何首乌简介  6-7
  第二节何首乌的已知化学成分  7-9
  第三节生何首乌与制何首乌的差别  9-15
  第四节二苯乙烯苷的药理学研究进展  15-23
  参考文献  23-28
第二篇制首乌醇提物的正丁醇萃取物分离纯化及对人脐静脉血管内皮细胞的生长影响  28-48
  中文摘要  28-29
  英文摘要  29-31
  第一节前言  31-32
  第二节分离与纯化  32-40
    一仪器、试剂和材料  32
    二正丁醇层浸膏的分离纯化  32-35
    三结果  35-40
  第三节生物活性研究  40-45
    一仪器、试剂和材料  40-42
    二操作步骤  42-43
    三结果  43-45
  第四节讨论  45-47
  参考文献  47-48
第三篇生首乌水提物的乙酸乙酯萃取物分离纯化及对组蛋白去乙酰化酶的作用  48-73
  中文摘要  48-49
  英文摘要  49-51
  第一节前言  51-53
  第二节提取、分离与纯化  53-64
    一仪器、试剂和材料  53
    二生首乌的提取、分离与纯化  53-56
    三结果  56-64
  第三节生物活性研究  64-70
    一仪器、试剂和材料  64-66
    二操作步骤  66-69
    三结果  69-70
  第四节讨论  70-72
  参考文献  72-73
全文小结  73-74
附图I 光谱图  74-78
致谢  78-79
发表文章  79

广西产何首乌有效成分分离纯化及生物活性研究

内容摘要

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