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蚯蚓粪中拮抗菌的发酵条件优化及其在防治植物病害中的应用

作　者: 王东辉
导　师: 孙振钧
学　校: 中国农业大学
专　业: 生态学
关键词: 有机废弃物 拮抗作用 发酵 球孢链霉菌 丁香苷链霉菌
分类号: X713
类　型: 硕士论文
年　份: 2004年
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内容摘要


本研究是国家863项目“农业、畜禽废弃物资源的高质化产品研制和开发”课题（2001AA246092）和国家十五科技攻关课题“利用秸秆畜禽粪便开发生物有机肥技术研究”（2002BA516AD3）中的部分内容。以蚯蚓养殖为基础，明确蚯蚓对畜禽粪便等有机废弃物的生态处理作用，侧重于对蚯蚓处理有机废弃物后的产物进行综合的资源化利用，研究开发蚯蚓系列产品。 （1）在本研究中，采用培养皿生物测定、盆栽试验确定了蚯蚓粪中抑菌物质的存在，并对部分植物病害有抑制作用；蚯蚓粪与病土混合后其中的微生物区系的变化情况；单因素设计、多因素正交设计对分离出的两株拮抗菌的发酵培养基，得出球孢链霉菌发酵（Streptomyces globisporus）培养基为每1000ml培养基中山梨醇10g、酵母膏5g、牛肉膏5g、CaCO35g、MgSO45g、NaCl 0.5g、FeSO4 0.01g，丁香苷链霉菌（Streptomyces syringini）培养基为每1000ml培养基中葡萄糖30g、淀粉30g、蛋白胨5g、KNO3 0.4g、CaCO3 5g、MgSO4 0.5g、NaCl 0.5g、FeSO40.01g。 （2）单因素试验进行培养条件优化，确定较为高效的培养条件，对球孢链霉菌（Streptomyces globisporus）：发酵过程保持的最适温度为30℃，种龄为36h，初始pH值为7.5，摇床转速为150r／min，发酵时间为36-48h，接种量为10％；对丁香苷链霉菌（Streptomyces syringini）：发酵过程保持的最适温度为30℃，种龄为48h，初始pH值为7.0，摇床转速为150r／min，发酵时间为36-48h，接种量为15％。 （3）对培养基进行再次优化，对其中部分原料以成本较低的玉米粉和黄豆饼粉进行替代，对于球孢链霉菌，以玉米粉和黄豆饼粉不同比例取代山梨醇和牛肉膏，采用抑菌活性最强的处理水平，玉米粉与黄豆饼粉质量比为15／5，得到的抑菌结果显著小于原培养基结果。对于丁香苷链霉菌，原培养基中的淀粉和蛋白胨被玉米粉和黄豆饼粉以不同比例替代，并且降低葡萄糖含量，采用抑菌活性最强的处理水平，玉米粉与黄豆饼粉质量比为20／10，得到了与原培养基相当的结果。发酵罐培养与摇瓶培养作对照试验，初步探索了在进行大量生产时的影响因素。 （4）对影响拮抗菌发酵液抑菌活性的因素进行研究，试验结果显示，在高温、紫外照射以及在4℃冰箱内保存，随着时间的延长，发酵液抑菌活性出现不同程度的下降。进行不同倍数的浓度稀释，球孢链霉菌发酵液稀释到超过130倍，丁香苷链霉菌发酵液稀释到超过100倍的时候，不再显示出明显的抑菌作用。 （5）黄瓜、西红柿的盆栽、田间试验研究两株拮抗菌对防治植物病害的效果。在发酵液稀释不同倍数后经过喷施叶面或者灌根处理，一定程度上降低了病害的发生。

全文目录


摘要  3-4
英文摘要  4-7
第一章 绪论  7-20
  1.1 研究目的  7
  1.2 研究意义  7-8
  1.3 国内外研究现状  8-19
  1.4 总体研究技术路线  19-20
第二章 蚯蚓粪对植物病害的防治作用  20-29
  2.1 材料与方法  20-22
  2.2 结果与分析  22-26
  2.3 讨论  26-29
第三章 拮抗菌摇瓶发酵培养原料优化选择  29-37
  3.1 材料与方法  29-30
  3.2 结果与分析  30-36
  3.3 讨论  36-37
第四章 环境条件对蚯蚓粪中拮抗菌产生抑菌物质的影响  37-47
  4.1 材料与方法  37-38
  4.2 结果与分析  38-46
  4.3 讨论  46-47
第五章 蚯蚓粪中拮抗菌对黄瓜、西红柿病害的抑制  47-52
  5.1 材料与方法  47-49
  5.2 结果与分析  49-51
  5.3 讨论  51-52
第六章 结论  52-53
参考文献  53-58
致谢  58-59
附录  59
附图1 单层琼脂平板扩散法测发酵液抑菌  59-60
附图2 蚯蚓粪对黄瓜苗期立枯病的防治效应  60
附图3 球孢链霉菌孢子丝形态特征  60-61
附图4 丁香苷链霉菌孢子丝形态特征  61
附图5 中国农业大学曲周实验站发酵设备  61-62
附图6 拮抗菌发酵液用于防治西红柿、黄瓜病害试验  62-63
作者简历  63

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中图分类: > 环境科学、安全科学 > 废物处理与综合利用 > 农业废物处理与综合利用 > 畜牧业
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