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生物芯片化学发光免疫法检测人TSH和T4的研究

作　者: 杨勇
导　师: 何昭阳
学　校: 吉林农业大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 化学发光酶免疫分析 生物芯片 促甲状腺素 甲状腺素
分类号: R446.6
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要


化学发光分析在临床实验中具有灵敏度高、线性范围宽的优点，因此被广泛的应用于免疫检测、蛋白质和核酸微阵列分析以及流动注射分析当中。同时生物芯片分析系统因其微型化、高效、低耗等优点在免疫检测、环境检测与保护等领域具有巨大的应用潜力。为了实现快速、灵敏、低成本的目的，本研究在生物芯片上进行化学发光免疫分析试验。本论文主要针对生物芯片化学发光免疫分析新方法的建立和应用开展了一系列研究，对于病原、激素和环境污染物的检测方面有非常重要的应用价值。全文共分为三章： 第一章 本章综述了化学发光免疫分析的基本原理及应用。详细介绍化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析反应机理和应用。以及论述了微流控芯片的发展、研究现状及应用。同时还介绍了生物芯片的制作材料、加工技术、应用。 第二章 本章设计化学发光反应池，使用玻璃材料制作了芯片。在磁性酶免疫测量分析为基础上，建立了芯片式磁化学发光酶免疫分析法。使用3—(2′—螺旋金刚烷)—4—甲氧基—4—(3″-羟基)苯1，2—二氧杂环丁烷磷酸钠(PPD)—碱性磷酸酶(ALP)化学发光体系对甲状腺素 的学位论文">促甲状腺素(TSH)进行测定。测定的线性范围为0.094～50mIU/L；批内变异系数和批间变异系数均在12.7％之内；回收率在91％～109％之间；利用本法对血清样品进行了测定，并与其它化学发光免疫分析方法进行了比较，其相关系数为0.9650和0.98892。灵敏度为0.094 mIU/L。 第三章 使用本研究新建立的芯片式检测方法检测甲状腺激素(T4)。测定的线性范围为20～150 ng/ml；批内变异系数和批间变异系数均在5.86％之内；血清样品的测定，并与其它免疫分析方法进行了比较，其相关系数为0.98859。灵敏度为4.5 ng/l。

全文目录


中文摘要  3-4
英文摘要  4-8
第一章 绪论  8-25
  1.1 化学发光免疫分析  8-13
    1.1.1 化学发光免疫分析基本原理  8-9
    1.1.2 化学发光免疫分析方法  9-10
    1.1.3 化学发光基本原理  10
    1.1.4 化学发光酶免疫分析  10-12
    1.1.5 化学发光免疫分析研究展望  12-13
  1.2 生物芯片技术  13-20
    1.2.1 生物芯片的发展历程  13-14
    1.2.2 芯片的制作材料  14
    1.2.3 芯片的加工制作  14-18
    1.2.4 微流控芯片的应用研究现状  18-20
    1.2.5 生物芯片应用的展望  20
  1.3 检测对象及检测原理  20-25
    1.3.1 促甲状腺激素  20
    1.3.2 甲状腺素  20-21
    1.3.3 生物芯片化学发光免疫法的简介  21-25
第二章 生物芯片磁酶免疫分析法对促甲状腺激素(TSH)的检测  25-43
  2.1 玻璃芯片的设计和制作  25-28
    2.1.1 实验材料与试剂  25-26
    2.1.2 玻璃芯片的制作方法  26-28
  2.2 免疫学检测部分  28-31
    2.2.1 主要试剂和仪器  28-29
    2.2.2 实验方法  29-31
  2.3 结果  31-41
    2.3.1 实验条件确定的结果  31-35
    2.3.2 生物芯片磁酶免疫分析法对TSH的检测步骤  35
    2.3.3 TSH检测的实验结果  35-41
  2.4 讨论  41-43
    2.4.1 磁分离酶联免疫试剂盒  41-42
    2.4.2 生物芯片的使用  42
    2.4.3 灵敏度  42
    2.4.4 反应速度的提高  42-43
第三章 生物芯片磁酶免疫分析法对甲状腺激素(T4)的检测  43-48
  3.1 主要试剂和仪器  43
    3.1.1 试剂  43
    3.1.2 主要仪器  43
    3.1.3 溶液的配制  43
  3.2 实验方法  43-44
    3.2.1 免疫反应的检测操作  43-44
    3.2.2 免疫检测部分  44
  3.3 结果与分析  44-47
    3.3.1 标准曲线与灵敏度  44-46
    3.3.2 实际样品的检测  46-47
  3.4 讨论  47-48
结论  48-49
参考文献  49-53
致谢  53-54
作者简历  54

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中图分类: > 医药、卫生 > 临床医学 > 诊断学 > 实验室诊断 > 免疫学检验
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