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TGF-β1及其信号传导分子Smad2和Smad4在羊驼睾丸的表达与定位

作　者: 闫永平
导　师: 董常生
学　校: 山西农业大学
专　业: 临床兽医学
关键词: 羊驼睾丸 TGF-β1 Smad2 Smad4 westem blotting SABC
分类号: Q78
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
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内容摘要

雄性生殖机能及其调控机制的研究历来受到广泛关注,雄性生殖腺—睾丸雄性激素的分泌与精子的发生受到多种因素的调节,TGF-β1及其细胞内信号传导分子Smad2与Smad4蛋白参与睾丸发育及精子发生的调控。为了阐明TGF-β1在羊驼睾丸发育及精子发生中的作用及其作用的分子机制,本实验以12月龄和24月龄的羊驼睾丸为研究对象,采用Western Blotting技术,对TGF-β1,Smad2与Smad4在羊驼睾丸蛋白水平的表达进行研究;采用免疫组织化学SABC法对TGF-β1、Smad2与Smad4在羊驼睾丸的表达进行组织学定位。免疫组化的定量采用Mias-2000图象分析系统进行光密度(Opitical density,OD)的测定,实验结果用One-Way ANOVA单因子方差分析。 Westem blotting结果显示羊驼睾丸组织粗蛋白提取物中存在分子量约为25KD,与多克隆兔抗TGF-β1抗体发生免疫阳性反应的蛋白条带;分子量约为52KD,与多克隆兔抗Smad2抗体发生免疫阳性反应的蛋白条带;分子量约为62KD,与多克隆兔抗Smad4抗体发生免疫阳性反应的蛋白条带;免疫组化结果显示TGF-β1及其细胞内信号传导分子Smad2与Smad4在12月龄和24月龄羊驼睾丸的间质细胞、支持细胞和各级生精细胞均有不同程度的表达。光密度测定结果显示:TGF-β1在12、24月龄羊驼睾丸间质细胞的光密度分别为0.7305±0.0115、0.5626±0.0122,在支持细胞分别为0.4207±0.0130、0.3257±0.0082,在精原细胞分别为0.4579±0.0092、0.3743±0.0158(P<0.01),在管周肌样细胞分别为0.64554±0.0820、0.65694±0.0230(p>0.05);Smad2在12、24月龄羊驼睾丸间质细胞的光密度分别为0.54460±01034、0.5712±0.0086(p>0.05),在支持细胞为0.1741±0.0088、0.3794±0.01066,在精原细胞为0.30160±.01440、0.5604±0.0078(P<0.01);Smad4在12、24月龄羊驼睾丸的间质细胞的光密度分别为0.7425±0.0113、0.6599±0.0107,在支持细胞为0.2552±0.0129、0.4699±0.0083,在精原细胞为0.4417±0.0138、0.5136±0.0089(p<0.01),TGF-β1、Smad2与Smad4在同一年龄阶段的不同细胞的表达差异显著(p<0.01,P<0.05)。结论:羊驼睾丸有TGF-β1及其细胞内信号传导分子Smad2与Smad4的表达;TGF-β1

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中文摘要  5-7
前言  7-13
  1.睾丸生长发育的调节因子  7-8
  2.TGF-β1在睾丸中的表达及研究展  8-10
  3.TGF-β受体  10
  4.Smads在睾丸中的表达  10-11
  5.羊驼的生殖特性  11-13
材料与方法  13-17
  1.组织材料  13
  2.免疫印记杂交反应(Western Blotting Hybridization)  13-14
  3.HE染色  14-15
  4.免疫组织化学SABC反应  15-17
结果  17-23
  1.Western Blotting印迹杂交结果  17
  2.HE染色结果  17
  3.免疫组化结果  17-23
讨论  23-28
  1.羊驼睾丸组织学结构特征分析  23
  2.TGF-β1在羊驼睾丸表达的分析  23-25
  3.Smad2蛋白在羊驼睾丸表达的分析  25-26
  4.Smad4在羊驼睾丸表达的分析  26-27
  5.TGF-β1与Smad2、Smad4在羊驼睾丸表达的分析  27-28
结论  28-29
参考文献  29-33
英文摘要  33-34
附图  34-39
图版说明  39-43
致谢  43

TGF-β1及其信号传导分子Smad2和Smad4在羊驼睾丸的表达与定位

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