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CR16在睾丸组织中的表达及其与无精子症发病相关性的初步探讨

作 者: 温子娜
导 师: 相文佩
学 校: 华中科技大学
专 业: 妇产科学
关键词: 糖皮质激素区域表达基因16 SD大鼠 睾丸 支持细胞 支持细胞与生精细胞连接区 =糖皮质激素区域表达基因16 非梗阻性无精子症 梗阻性无精子症 神经型威奥综合征蛋白 无精子症 N-WASP-CR16复合物
分类号: R698
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要


实验一CR16在正常SD大鼠睾丸组织中的表达目的检测糖皮质激素区域表达基因16 (Corticosteroids and regional expression 16,CR16)在正常SD大鼠睾丸组织中的表达,为后续研究CR16在人类生殖系统的表达提供前期动物实验及方法学准备。方法采用免疫组织化学法检测CR16蛋白在5只正常SD大鼠睾丸组织中的表达情况。结果CR16蛋白表达于大鼠睾丸生精小管上皮,主要分布在支持细胞、支持细胞与生精细胞连接区(Sertoli cell-spermatid junctions, SspJs)。结论CR16在大鼠睾丸组织中定位于支持细胞及SspJs,提示CR16可能参与精子发生过程。实验二CR16在无精子症患者及正常男性睾丸组织中的定位及定量表达目的研究CR16在梗阻性无精子症 的学位论文">非梗阻性无精子症患者、梗阻性无精子症患者及正常男性睾丸组织中的定位及定量表达,探讨CR16与无精子症发病的相关性。方法采用免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriptpolymerase chain reaction,RT-PCR)检测CR16蛋白和CR16 mRNA在6例非梗阻性无精子症患者、23例梗阻性无精子症患者和6例正常男性睾丸组织中的表达情况。结果CR16蛋白表达于睾丸生精小管上皮,主要分布在支持细胞胞浆、胞膜及SspJs,非梗阻性无精子症患者睾丸组织中CR16蛋白的表达明显弱于梗阻性无精症患者及正常男性。非梗阻性无精子症患者睾丸组织中CR16 mRNA的表达(0.640±0.021)显著弱于正常男性(0.952±0.036)(P<0.01),梗阻性无精子症患者睾丸组织中CR16 mRNA的表达(0.953±0.036)与正常男性睾丸组织中CR16 mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论非梗阻性无精子症患者睾丸组织中CR16表达水平显著降低,提示CR16实验三CR16在无精子症发病机制中的初步探讨目的研究神经型威奥综合征蛋白(neural Wiscott-Aldrich syndrome protein,N-WASP)在非梗阻性无精子症患者及正常男性睾丸组织中的定位及定量表达,探讨CR16与N-WASP在人睾丸组织中的相关性及其在精子发生中的作用。方法采用免疫组织化学法和RT-PCR法检测N-WASP mRNA在6例非梗阻性无精子症患者和6例正常男性睾丸组织中的定位及定量表达;用免疫荧光双标记法及激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscopy, LSCM)观察CR16与N-WASP在非梗阻性无精子症患者和正常男性睾丸组织中的共表达情况。结果N-WASP蛋白表达于睾丸生精小管上皮,主要分布在支持细胞胞浆、胞膜及SspJs,非梗阻性无精子症患者睾丸组织中N-WASP蛋白的表达明显弱于正常男性。非梗阻性无精子症患者睾丸组织中N-WASP mRNA的表达(0.645±0.025)显著弱于正常男性(0.960±0.031)(P<0.01)。CR16 mRNA与N-WASP mRNA在非梗阻性无精子症患者睾丸组织中的相对表达量约为1:1,二者在正常男性睾丸组织中的mRNA相对表达量也约为1:1。免疫荧光双标结果显示,CR16与N-WASP在睾丸SspJs处的表达相叠加,说明二者是以复合物的形式存在于人类睾丸组织中。结论非梗阻性无精子症患者睾丸组织中CR16与N-WASP表达水平均显著降低,CR16与N-WASP在SspJs处共表达,提示二者可能以N-WASP-CR16复合物的形式发挥协同作用,可能参与非梗阻性无精子症的发病。

全文目录


英文缩略词表  5-6
中文摘要  6-9
英文摘要  9-12
引言  12-16
  参考文献  13-16
实验一 CR16 在正常SD 大鼠睾丸组织中的表达  16-21
  材料和方法  16-19
  结果  19-20
  参考文献  20-21
实验二 CR16 在无精子症患者及正常男性睾丸组织中的定位及定量表达  21-32
  材料和方法  21-26
  结果  26-29
  讨论  29-30
  参考文献  30-32
实验三 CR16 在无精子症发病机制中的初步探讨  32-46
  材料和方法  32-37
  结果  37-42
  讨论  42-44
  参考文献  44-46
实验小结  46-47
综述  47-54
  参考文献  51-54
硕士期间发表的论文  54-55
致谢  55

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中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 泌尿科学(泌尿生殖系疾病) > 男子性机能障碍
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