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理冲生髓饮对人卵巢癌细胞株SKOV3信号转导基因表达的影响

作　者: 怀其娟
导　师: 韩凤娟
学　校: 黑龙江中医药大学
专　业: 中医学
关键词: 卵巢癌 SKOV3 理冲生髓饮 基因芯片 信号转导
分类号: R273
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的：应用信号转导基因芯片技术观察理冲生髓饮作用后人卵巢癌细胞株SKOV3基因表达谱,筛选差异表达基因,从信号转导方面探讨中药复方理冲生髓饮对人卵巢癌细胞株SKOV3的作用机制。方法：Wistar大鼠随机分为两组,灌胃给药,采血制备含药血清,干预对数生长期人卵巢癌细胞株SKOV3,提取生理盐水组及理冲生髓饮组卵巢癌细胞mRNA,制备DNA探针并分别用Cy3和Cy5两种荧光染料标记,与基因表达谱芯片进行杂交,经扫描、分析,得出药物作用后信号转导方面表达有差异的基因。结果：共筛选出显著表达差异基因102个,其中19个基因表达上调,83个基因表达下调,上调基因中有代表性的是PTEN.Vavl及FADD基因,下调基因中有代表性的是R-Ras和HIF-1α基因。结论：1.理冲生髓饮能调节人卵巢癌细胞株SKOV3信号转导相关基因的表达。2.理冲生髓饮可能通过上调卵巢癌PTEN、Vav1、FADD基因和下调R-Ras、HIF-1α基因表达,发挥抗癌、抑制转移、提高机体免疫功能以及增加化疗敏感性的作用。

全文目录


缩略语表  4-5
中文摘要  5-6
ABSTRACT  6-7
前言  7-8
文献综述  8-32
  一.现代医学对卵巢癌的认识  8-24
    1.病因学及流行病学研究  8-9
      1.1 个人因素  8
      1.2 环境因素  8-9
      1.3 遗传因素  9
      1.4 生殖因素  9
    2.发病机制研究  9-15
      2.1 卵巢癌与癌基因  9-10
      2.2 卵巢癌与抑癌基因  10-12
      2.3 卵巢癌与信号转导通路  12-15
    3.卵巢癌的早期诊断  15-18
      3.1 CA125肿瘤标志物  16
      3.2 最新研究的肿瘤标志物  16-17
      3.3 新的检测手段  17-18
    4.卵巢癌的治疗  18-24
      4.1 手术治疗  18-19
      4.2 化学治疗  19-20
      4.3 治疗进展  20-24
  二.祖国医学对卵巢癌的认识  24-28
    1.古代医家对卵巢癌的认识  24-26
      1.1 病因病机  24-26
      1.2 治法方药  26
    2.现代医家对卵巢癌的认识  26-28
  三.基因芯片技术在研究卵巢癌相关基因中的应用  28-32
    1.基因芯片技术在卵巢癌发病机制研究中的应用  28-29
    2.基因芯片技术在卵巢癌早期诊断研究中的应用  29-30
    3.基因芯片在卵巢癌化疗耐药机制研究中的应用  30-32
材料和方法  32-38
  一.肿瘤细胞株  32
  二.实验动物  32
  三.基因芯片  32
  四.实验药物  32
  五.实验试剂  32
  六.实验仪器  32-33
  七.实验方法  33-38
    1.药物血清制备  33
    2.分组及药物血清培养液的制备  33-34
    3.细胞培养  34
    4.人信号转导基因芯片检测理冲生髓饮含药血清对基因表达的影响  34-38
      4.1 收获细胞  34
      4.2 离心沉淀细胞  34-35
      4.3 RNA质量检测  35-36
      4.4 探针合成  36
      4.5 芯片杂交  36-37
      4.6 化学发光检测  37
      4.7 图象采集和数据分析  37-38
实验结果  38-43
  1.变性琼脂糖凝胶电泳  38
  2.基因芯片扫描结果  38-39
    2.1 叠加图  38-39
    2.2 散点图  39
  3.基因芯片筛选出的差异基因  39-43
讨论  43-50
  一.消癥散结、扶正固本法的建立  43-44
  二.理冲生髓饮的建立  44
  三.理冲生髓饮对人卵巢癌细胞株信号转导相关基因表达的影响  44-50
    1.上调基因  44-47
    2.下调基因  47-50
结论  50-51
致谢  51-52
参考文献  52-61
攻读硕士学位期间发表论文  61-63
个人简介  63

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中医肿瘤科
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