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多糖类提取物及MF59佐剂对流感灭活疫苗免疫增强作用研究

作　者: 谢国秀
导　师: 陈则
学　校: 湖南师范大学
专　业: 微生物学
关键词: 佐剂 流感病毒 灭活疫苗 MF59 多糖
分类号: R392
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要


本论文由两部分组成：中药多糖类提取物对流感灭活疫苗的免疫增强作用研究；MF59佐剂于不同免疫途径下作流感灭活疫苗的佐剂效果比较研究。(一)中药多糖类提取物对流感灭活疫苗的免疫增强作用研究(1)枸杞多糖(LBP)、黄芪多糖(APS)对A／PR／8流感灭活疫苗的体液免疫应答作用研究。不同剂量的LBP (300μg、500μg和800μg)或APS(300μg和500μg),及100μg的氢氧化铝分别与A／PR／8疫苗混合,经i.p.或i.m.两条免疫途径共免疫小鼠两次,间隔三周。ELISA检测实验结果表明,LBP、APS无论经i.p.或i.m.免疫,均能明显提高小鼠的抗体滴度,且呈现一定的剂量依赖性；高剂量的LBP及APS佐剂效果与氢氧化铝相当。(2)茯苓多糖(pachymaran)能否作为低剂量(0.015μg)或高剂量(1.5μg)A／PR／8流感灭活疫苗的佐剂,增强疫苗的免疫原性。不同剂量的pachymaran(200μg和100μg)或100μg的氢氧化铝与A／PR／8流感灭活疫苗经i.m.共免疫小鼠,一免后三周通过检测抗体水平、病毒攻击后小鼠的体重变化及保护率等几个方面检测其效果。结果如下：①pachymaran对低剂量A／PR／8疫苗的佐剂效应1000μg pachymaran IgG、IgG1、IgG2a抗体滴度均显著高于200μg pachymaran组和单独A／PR／8疫苗组；攻毒后明显降低了小鼠的体重丢失及肺部病毒量,提高小鼠的存活率,保护效果与氢氧化铝相当。②pachymaran对高剂量A／PR／8疫苗的佐剂效应Pachymaran仍能提高小鼠的IgG.IgG1、IgG2a抗体滴度,效果却逊于铝佐剂组,然而病毒攻击后,其体重丢失率却与铝佐剂组差异不大。(二)检测MF59于不同免疫途径下的佐剂效果。将MF59与A／PR／8疫苗混合,分别经i.p.、i.m.、i.v.和i.n.共免疫小鼠一次或两次,间隔三周,一免后四周或加强免疫后一周用致死量流感病毒攻击小鼠,检测小鼠血清抗体滴度、体重丢失率及保护率。结果表明i.p.优于i.m.;i.v.产生的抗体效价与i.m.相当,然而保护效果却逊于i.m.；i.n.最差。

全文目录


摘要  3-5
ABSTRACT  5-12
第一章 前言  12-35
  第一节 流感病毒的基本特征、危害和预防  12-13
    1 流感病毒的基本特征  12
    2 流感病毒的危害  12-13
    3 流感的预防  13
  第二节 中药多糖类提取物的研究概述  13-25
    1 多糖的免疫增强作用研究  14-18
    2 多糖免疫调节作用机制  18-21
    3 多糖的其它生物活性  21-23
    4 几种重要多糖的简要概述  23-25
  第三节 MF59油乳佐剂的研究概述  25-35
    1 MF59研究历史  26-28
    2 MF59的组成成分  28
    3 MF59制备工艺  28
    4 MF59临床前研究  28-29
    5 MF59临床研究  29-31
    6 MF59安全性  31
    7 MF59作用机制  31-32
    8 MF59发展  32-33
    9 展望  33-35
第二章 中药多糖类提取物对流感灭活疫苗的免疫增强作用  35-56
  第一节 材料与方法  36-41
    1 动物、病毒和细胞  36-37
    2 主要试剂  37-38
    3 主要仪器  38
    4 所用溶液  38-39
    5 免疫  39-40
    6 样本收集  40
    7 ELISA  40
    8 肺部病毒滴度检测  40-41
    9 统计分析  41
  第二节 结果分析  41-50
    1 枸杞多糖(LBP)对A/PR/8流感灭活疫苗的免疫增强作用研究  41-43
    2 黄芪多糖(APS)对A/PR/8流感灭活疫苗的免疫增强作用研究  43-44
    3 茯苓多糖对A/PR/8流感灭活疫苗的免疫增强作用研究  44-50
  第三节 讨论  50-56
    1 枸杞多糖(LBP)能显著提高A/PR/8流感灭活疫苗的体液免疫应答反应  50-51
    2 黄芪多糖(APS)能显著提高A/PR/8流感灭活疫苗的体液免疫应答反应  51-52
    3 茯苓多糖(pachymaran)对A/PR/8流感灭活疫苗的免疫增强作用研究  52-56
第三章 MF59于不同免疫途径下作流感灭活疫苗佐剂效果比较研究  56-67
  第一节 材料与方法  57-59
    1 动物、病毒、细胞  57
    2 主要试剂  57
    3 免疫  57-58
    4 病毒感染  58
    5 样本收集  58
    6 ELISA  58-59
    7 统计分析  59
  第二节 结果分析  59-63
    1 MF59佐剂不同途径下对A/PR/8流感疫苗诱生特异性抗体应答  59-60
    2 致死量同型流感病毒攻击后小鼠的体重变化  60-62
    3 致死量同型流感病毒攻击后,MF59佐剂对A/PR/8流感疫苗不同免疫途径诱生的免疫保护力  62-63
  第三节 讨论  63-67
参考文献  67-76
缩写表  76-77
读研期间论文发表和录用情况  77-78
致谢  78-79

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医学免疫学
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