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黄荆提取物对小菜蛾和菜青虫生物活性及作用方式的研究

作　者: 袁林
导　师: 薛明
学　校: 山东农业大学
专　业: 农业昆虫与害虫防治
关键词: 黄荆小菜蛾菜青虫作用方式杀虫机理
分类号: S482.39
类　型: 硕士论文
年　份: 2004年
下　载: 253次
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内容摘要

黄荆(Vitex negundo Linn.)属马鞭草科,黄荆属。在我国分布广泛,山东泰山野生资源非常丰富。本文以为害十字花科蔬菜的重要害虫小菜蛾和菜青虫为主要对象,系统研究了黄荆杀虫活性物质的提取方法、作用方式,并初步探讨了其作用机理。为进一步开发利用这一野生杀虫植物资源和未来仿生合成奠定基础,对害虫的可持续治理具有重要的理论和实践意义。主要研究结果如下:1.明确了黄荆杀虫活性物质的提取条件和方法。选用二氯甲烷、石油醚、丙酮、甲醇和乙醇5种极性不同的有机溶剂,采用冷浸法,分别提取黄荆的种子和叶片中的活性物质,提取液经抽滤、净化、浓缩得到膏状纯品。筛选出适宜的替换溶剂和乳化剂。通过对小菜蛾的杀虫活性测定,明确了二氯甲烷种子提取物杀虫活性最高,二氯甲烷叶子提取物次之,甲醇和石油醚提取物活性较差,乙醇和丙酮提取物的杀虫活性最差。筛选出25℃作为适宜的二氯甲烷种子提取物的提取温度。综合分析明确黄荆种子是提取黄荆杀虫活性成分的最佳原材料。2.黄荆提取物对小菜蛾、菜青虫、荻草谷网蚜和桃蚜均表现出高的杀虫活性;对天敌异色瓢虫安全性好。用二氯甲烷种子提取物4 mg/ml剂量处理小菜蛾3龄幼虫、菜青虫4龄幼虫、荻草谷网蚜和桃蚜的无翅成蚜,24h的校正死亡率分别为78.3%、91.7%、79.6%和75.7%。用相同剂量处理异色瓢虫成虫和4龄幼虫,处理后24h死亡率分别为0%和15%,对成虫安全,对幼虫存活略有影响。3.系统研究黄荆提取物对小菜蛾和菜青虫不同龄期幼虫的触杀毒力。二氯甲烷种子提取物对1龄、2龄、3龄和4龄小菜蛾幼虫的LC50分别为0.474 mg/ml 、0.835 mg/ml 、1.707mg/ml和1.832 mg/ml;对菜青虫2.4龄幼虫的LC50 为0.641 mg/ml 和1.328mg/ml;龄期之间毒力差异显著,对小菜蛾1龄幼虫的毒力是4龄虫的3.86倍,菜青虫2龄幼虫的毒力是4龄虫的2.07倍。4. 黄荆提取物对小菜蛾成虫产卵有明显的忌避作用。其中以甲醇叶片提取物和二氯甲烷种子提取物作用最强,在4mg/ ml浓度下,选择忌避率分别为61.56%和55.40%;且有一定的持效性,处理后108小时忌避率仍<WP=7>达40%以上。乙醇叶片提取物处理后24h选择忌避率在49.6%;甲醇种提物、乙醇种提物和石油醚提取物的忌避作用则较差。5. 用黄荆二氯甲烷种子提取物以4mg/ ml浓度,对小菜蛾和菜青虫卵的毒杀作用不明显,对小菜蛾和菜青虫幼虫基本无胃毒作用。6、黄荆提取物对小菜蛾和菜青虫幼虫的取食量、生长发育和繁殖有明显的影响。分别用二氯甲烷种子提取物和甲醇叶片提取物4mg/g浓度处理寄主叶片,能导致小菜蛾3龄幼虫和菜青虫4龄幼虫的取食量明显下降。用二氯甲烷种子提物LC50处理小菜蛾2、4龄幼虫和菜青虫4龄幼虫,存活幼虫的化蛹率、蛹重、羽化率、成虫产卵量以及幼虫孵化率有明显下降,而对发育历期影响不大。处理小菜蛾4龄幼虫比处理2龄幼虫效果更明显。7、用黄荆二氯甲烷种提物处理小菜蛾和菜青虫幼虫后,其中毒症状独特,能使虫体迅速瘫软、麻痹、死亡,亚致死剂量处理的试虫中毒后能恢复。呼吸测定证明,试虫中毒后呼吸量急剧下降,复苏个体的呼吸量可逐渐回升;呼吸量下降的幅度和回升的时间和幅度均决定于处理剂量。8. 黄荆提取物对菜青虫作用机制的初探得出,其二氯甲烷种子提取物对幼虫体内乙酰胆碱酯酶有一定的抑制作用,处理后12h对乙酰胆碱酯酶(AChE)比活力的抑制率为58.57%;而对离体酶的抑制作用更强,其抑制效果与毒死蜱的作用效果相当,说明乙酰胆碱酯酶是黄荆提取物的主要作用靶标之一。黄荆提取物对幼虫体内谷胱甘肽-S-转移酶(GST)和羧酸酯酶(CarE)的活性抑制率很低。

全文目录

中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
1 引言  10-19
  1.1 植物源杀虫剂的研究概况  10-17
    1.1.1 植物源杀虫剂的主要种类及应用现状  11-16
    1.1.2 植物源杀虫剂存在的问题  16-17
    1.1.3 植物源杀虫剂的应用前景  17
  1.2 黄荆的研究现状  17-19
2 材料与方法  19-33
  2.1 试虫  19-20
  2.2 生化试剂及供试药剂  20
  2.3 主要仪器  20-21
  2.4 试验方法  21-23
    2.4.1 黄荆杀虫活性成分提物条件的确定  21-22
      2.4.1.1 最佳提取溶剂的筛选与黄荆种子和叶片提取物生物活性的比较  21
      2.4.1.2 黄荆杀虫活性成分的提取与净化  21-22
      2.4.1.3 提取温度的确定  22
    2.4.2 黄荆种子提取物对几种害虫的杀虫活性  22-23
  2.4.3 黄荆提取物对小菜蛾和菜青虫幼虫的作用方式  23-25
    2.4.3.1 黄荆提取物对幼虫的触杀作用的测定方法  23
    2.4.3.2 黄荆提取物对成虫产卵忌避作用的测定方法  23-24
    2.4.3.3 黄荆提取物杀卵作用的测定方法  24
    2.4.3.4 黄荆提取物胃毒作用的测定方法  24
    2.4.3.5 黄荆提取物对幼虫取食和生长发育与繁殖的影响  24-25
  2.4.4 黄荆提取物对菜青虫幼虫的致毒效应和生理生化指标的影响  25-33
    2.4.4.1 中毒症状的观察  25
    2.4.4.2 黄荆提取物对幼虫呼吸的影响  25-26
    2.4.4.3 黄荆提取物对幼虫体内生理生化指标的影响  26-33
  2.4.5 黄荆提取物的室外药效  33
3 结果与分析  33-58
  3.1 黄荆杀虫活性成分的提物条件  33-36
    3.1.1 最佳提取溶剂的筛选和黄荆种子和叶片提取物生物活性的比较  33-35
    3.1.2 黄荆杀虫活性成分的提取率  35
    3.1.3 最佳提取温度的筛选  35-36
  3.2 黄荆种子二氯甲烷提取物的生物活性  36-37
  3.3 黄荆提取物对小菜蛾和菜青虫的作用方式  37-49
    3.3.1 黄荆提取物对幼虫的触杀作用  37-41
    3.3.2 黄荆提取物对小菜蛾成虫产卵的忌避作用  41-45
    3.3.3 黄荆种子二氯甲烷提取物的杀卵作用  45
    3.3.4 黄荆种子提取物对幼虫的胃毒作用  45
    3.3.5 黄荆提取物对幼虫取食和生长发育与繁殖的影响  45-49
      3.3.5.1 黄荆提取物对小菜蛾和菜青虫幼虫取食量的影响.  45-47
      3.3.5.2 黄荆种子二氯甲烷提取物对幼虫生长发育的抑制作用  47-49
  3.4 黄荆提取物对菜青虫幼虫的致毒效应和生理生化指标的影响  49-58
    3.4.1 中毒症状的观察  49
    3.4.2 对幼虫呼吸作用的影响  49-51
    3.4.3 对幼虫体内生理生化指标的影响  51-57
      3.4.3.1 乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性  51-52
      3.4.3.2 羧酸酯酶(CarE)的活性  52-54
      3.4.3.3 谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)的活性  54-57
    3.4.4 黄荆提取物室外药效  57-58
4 讨论  58-60
  4.1 黄荆提取物的作用方式  58
  4.2 黄荆提取物的杀虫机理  58-59
  4.3 黄荆提取物的应用前景  59-60
5 结论  60-62
6 参考文献  62-69
致谢  69-70
攻读硕士学位期间发表论文情况  70

黄荆提取物对小菜蛾和菜青虫生物活性及作用方式的研究

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