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高糖环境对豚鼠膀胱Cajal样细胞形态、超微结构的影响

作　者: 范勇洪
导　师: 丁国富
学　校: 石河子大学
专　业: 外科学
关键词: Cajal样细胞高糖环境钙离子超微结构
分类号: R587.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

旦的：通过观察高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞(interstitial cells of Cajal, ICCs)形态及超微结构的变化,探讨高糖环境对豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的影响。方法：酶消化法原代培养豚鼠膀胱Cajal样间质细胞,采用透射电镜观察在不同葡萄糖浓度(5、10、15mmol/L)不同时间段(24、72h)体外培养的ICCs样细胞的超微结构：采用激光共聚焦显微镜成像技术测量Fluo-4AM负载后的Cajal样间质细胞长度并记录其胞内钙离子荧光强度的变化。结果：透射电镜观察到随糖浓度增高和培养时间延长,ICCs样细胞内细胞器明显减少,线粒体大小不等,数量减少,肿胀、空泡样改变甚至溶解,内质网扩张、空泡样变,胞质广泛溶解,突起消失；电镜下还观察到部分膀胱Cajal样细胞间具有细胞间桥样结构；高浓度长时间培养下的Cajal样细胞染色后出现染色深浅不同的两类细胞,染色浅的细胞中出现微丝素成份,而染色深的细胞则出现了细胞液化坏死。运用激光共聚焦显微镜成像技术连续扫描和测量Cajal样细胞长度,见体外原代培养的膀胱Cajal样间质细胞随糖浓度增高,ICCs样细胞内钙离子荧光值5mmol/L/24h组和5mmol/L/72h组并无明显差别；与5mmol/L/24h组相比,10mmol/L/24h组是升高的,而15mmol/L/24h组则降低；10mmol/L72h组和15mmol/L/72h组都是升高的,但15mmol/L/72h组较10mmol/L/72h组低,开始出现下降趋势。ICCs样细胞长度：5mmol/L/24h组和5mmol/L/72h组并无明显差别；24h组随糖浓度增高,10mmol/L组和15mmol/L组ICCs样细胞长度逐渐缩短；72h组随糖浓度增高10mmol/L/72h组细胞长度增长,而15mmol/L/72h组细胞缩短。结论：高糖环境可对豚鼠膀胱Cajal样间质细胞造成形态学和超微结构的破坏,导致细胞钙离子内流发生异常,造成Cajal样间质细胞起搏功能减退或消失,这可能是DCP发病的重要原因之一。

全文目录

中文摘要  6-7
英文摘要  7-8
英文缩略词  8-9
前言  9-11
材料与方法  11-19
  1 材料  11-14
  2 技术路线  14-15
  3 方法  15-19
结果  19-22
  1 分离、培养后的豚鼠膀胱Cajal样细胞的鉴定  19
  2 高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样细胞形态及其超微结构的观察  19-20
  3 高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样细胞钙离子浓度及细胞长度的观察  20-22
讨论  22-27
  1 高糖环境下培养的原代Cajal样细胞间的差别  22
  2. 豚鼠膀胱Cajal样细胞超微结构与其功能关系  22-23
  3 高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样细胞超微结构改变的意义  23-25
  4 高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样细胞钙离子浓度和长度变化的意义  25-27
结论  27-28
展望  28-29
参考文献  29-32
附图  32-41
文献综述  41-46
  参考文献  43-46
致谢  46-47
作者简介  47
在学期间发表的文章  47-48
导师评阅表  48

高糖环境对豚鼠膀胱Cajal样细胞形态、超微结构的影响

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