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迷走神经切断术后小鼠胰岛内胰岛素、Bax蛋白表达及nNOS免疫阳性神经末梢分布的变化

作　者: 董梁
导　师: 凌树才
学　校: 浙江大学
专　业: 人体解剖与组织胚胎学
关键词: 胰岛胰岛素 Bax 神经元型一氧化氮合酶迷走神经切断术
分类号: R587.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

[目的]本实验主要通过免疫组织化学的方法,观察迷走神经干切断术后小鼠胰岛内胰岛素、Bax的蛋白表达和nNOS免疫阳性神经末梢分布的变化,探讨迷走神经切断术对胰岛素分泌、胰岛细胞的凋亡及NO在迷走神经调节胰岛素分泌中的作用,为进一步深入研究其在调控胰岛素分泌的机制提供资料。[方法]将28只小鼠随机分成实验组和对照组,其中实验组20只,对照组8只,对实验组小鼠行膈下迷走神经前、后干切断术,对照组仅打开腹腔,不切断迷走神经。分别于术后3、5、7、14d分时段处死小鼠,取胰,冷冻切片和石蜡切片,免疫组织化学方法观察小鼠胰岛内胰岛素、Bax的蛋白表达及nNOS免疫阳性神经末梢分布的变化。[结果]光镜下胰岛素蛋白表达定位于细胞质内,胰岛内大部分为胰岛素染色阳性细胞(胞浆着染棕色颗粒),即B细胞,图像分析显示：实验组各阶段胰岛素积分下吸光度均低于对照组,P<0.01,有统计学意义.光镜下Bax蛋白表达定位于细胞质内,实验组和对照组胰岛内均有Bax蛋白的阳性表达,实验组小鼠胰岛内Bax蛋白的阳性表达水平较对照组有显著提高。nNOS免疫阳性神经末梢主要位于胰岛细胞团块周围或深入内部,呈树枝状或念珠状分布,大多成束走行。迷走神经切断后小鼠胰内胰岛nNOS免疫阳性神经末梢的分布密度明显低于正常对照组。[结论]迷走神经参与胰岛素分泌的调控。迷走神经切除后Bax基因的高表达,提示迷走神经参与调控胰岛细胞凋亡。胰岛内nNOS免疫阳性神经纤维应为副交感神经的节后纤维,部分可能是来源于结状神经节的内脏感觉纤维,提示NO是迷走神经调节胰岛分泌的主要神经递质之一。

全文目录

致谢  4-5
中文摘要  5-7
Abstract  7-10
1 引言  10-12
2 材料和方法  12-14
  2.1 材料  12
  2.2 迷走神经切断造模和取材  12
  2.3 组织切片和胰岛素蛋白的免疫组织化学显色  12
  2.4 组织切片和Bax蛋白的免疫组织化学显色  12-13
  2.5 组织切片和NOS免疫组织化学显色  13-14
3 结果  14-19
4 讨论  19-22
5 结论  22-23
参考文献  23-26
综述  26-34
  参考文献  30-34
作者简历  34

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