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枸橼酸钾对肾结石大鼠肾组织骨桥蛋白及骨桥蛋白mRNA表达的影响

作　者: 才春东
导　师: 姜宁
学　校: 宁夏医科大学
专　业: 泌尿外科
关键词: 枸橼酸钾骨桥蛋白肾结石
分类号: R692.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的骨桥蛋白(osteopontin, OPN)是泌尿系结石形成的一种抑制蛋白,这种抑制结石形成的作用机制尚存在争议。本实验通过枸橼酸钾对肾结石大鼠肾OPN及OPN-mRNA表达的影响,进一步探讨枸橼酸酸钾与OPN及OPN-mRNA之间的相互关系,这不仅为解析肾结石发病机理提供实验依据,而且对临床上寻求肾结石的防治途径也具有一定的指导意义。方法32只8周龄雄性Wistar大鼠随机分为4组正常对照组、枸橼酸钾组、结石组(乙二醇和氯化氨)、结石+枸橼酸钾组,每组8只,采用乙二醇和氯化铵诱导大鼠肾草酸钙结石模型进行试验研究。饲养4周后取24h尿用EDTA法和比色法测定尿钙、尿草酸含量。处死大鼠取肾组织,采用HE染色、免疫组化、RT-PCR法分别检测各组大鼠结石形成、OPN及OPN-mRNA表达情况。结果①光镜下观察:结石+枸橼酸钾组和结石组大鼠均有结石生成,结石+枸橼酸钾组大鼠肾结石形成比结石组明显减少(P<0.05),对照组和单纯枸橼酸钾组未见结石生成。②24h尿钙、草酸含量:结石组和结石+枸橼酸钾组尿钙、草酸含量明显增加,与对照组和单纯枸橼酸钾组相比具有显著性差异(P<0.05)。但结石+枸橼酸钾组比结石组明显减少(P<0.05)。③免疫组织学检测OPN的表达结果:OPN在所有4组中均有表达,结石组与结石+枸橼酸钾组比对照组和单纯枸橼酸钾组明显增强(P<0.05);结石+枸橼酸钾组大鼠的OPN表达比结石组明显降低(P<0.05);枸橼酸钾组OPN表达与对照组相比无明显变化(P>0.05)。④RT-PCR检测OPN-mRNA的表达:RT-PCR显示OPN-mRNA在所有4组中均有表达,OPN-mRNA对照组、单纯枸橼酸钾组大鼠肾组织表达较弱;结石+枸橼酸钾组大鼠的OPN-mRNA表达比结石组明显降低(P<0.05);枸橼酸钾组OPN-mRNA表达与对照组相比无明显变化(P>0.05)。结论枸橼酸钾可能通过减少草酸钙结晶的形成以及对肾小管上皮细胞的损伤,减少草酸钙晶体在肾脏的沉积,减少OPN粘附于受损的上皮细胞表面的成核位点,并降低肾结石大鼠OPN及OPN-mRNA的表达,从而有效抑制大鼠肾草酸钙结石的形成。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
前言  10-12
第一部分枸橼酸钾对肾结石大鼠肾组织骨桥蛋白表达的影响  12-27
  材料与方法  12-20
  结果  20-24
  讨论  24-27
第二部分枸橼酸钾对肾结石大鼠肾骨桥蛋白mRNA 表达的影响  27-35
  材料与方法  27-32
  结果  32-33
  讨论  33-35
结论  35-36
参考文献  36-40
综述  40-47
  综述参考文献  44-47
致谢  47-48
攻读学位期间发表的学术论文目录  48-49
个人简介  49

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