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水蛭提取液对RF/6A细胞生长抑制的浓度筛选

作　者: 谭圣琰
导　师: 郑燕林
学　校: 成都中医药大学
专　业: 中医眼科学
关键词: 水蛭提取液恒河猴脉络膜-视网膜血管内皮细胞增殖抑制作用
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 41次
引　用: 1次
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内容摘要

目的筛选水蛭提取液对恒河猴脉络膜-视网膜血管内皮（RF/6A）细胞生长抑制的最佳浓度。方法1.RF/6A细胞进行体外培养,用倒置相差显微镜,每天观察细胞形态和生长情况。细胞爬片,用SABC法进行Ⅷ因子相关抗原检测,进行细胞鉴定。2.在预实验的基础上选择终浓度分别为128mg/ml、64mg/ml、32mg/ml、16mg/ml、8mg/ml、0mg/ml的水蛭提取液,分别作用于生长良好的RF/6A细胞24h后,观察不同稀释浓度提取液对细胞贴壁及生长的影响,以MTT法测定OD值,计算细胞生长抑制率,并求出半数抑制量(IC₅₀)。3.选择出对细胞无毒性反应的最佳抑制浓度,用于后期实验。结果8mg/ml、16mg/ml浓度组水蛭提取液对RF/6A的作用不明显,32mg/ml、64mg/ml、128mg/ml浓度组水蛭提取液对RF/6A均有明显抑制作用（P＜0.05）,但128mg/ml水蛭提取液作用后,形态学观察见细胞完全脱壁,破裂,考虑细胞毒性。故选定64mg/ml为本试验最佳药物浓度。结论体外培养的恒河猴脉络膜-视网膜血管内皮（RF/6A）细胞具有一定的增殖能力,水蛭提取液对RF/6A的增殖有一定的抑制作用。64mg/ml水蛭提取液能有效抑制体外培养的RF/6A细胞,且较为安全,稳定。本实验为寻找抗眼底新生血管的中药提供了前期实验依据。

全文目录

中文摘要  2-3
ABSTRACT  3-6
常用中英文缩略语表  6-7
1 引言  7-8
2 实验材料  8-11
  2.1 中药水蛭提取液的制备  8-9
  2.2 实验试剂与配制  9-10
  2.3 主要仪器及器材  10-11
3 恒河猴脉络膜-视网膜血管内皮细胞(RF/6A)的传代培养与鉴定  11-12
  3.1 恒河猴脉络膜-视网膜血管内皮细胞(RF/6A)的传代培养  11
  3.2 恒河猴脉络膜-视网膜血管内皮细胞(RF/6A)的鉴定  11-12
4 水蛭提取液对RF/6A增殖的影响  12-14
  4.1 细胞生长曲线的测定(MTT法)  12-13
  4.2 水蛭提取液对RF/6A增殖的影响  13-14
5 实验结果统计分析  14-19
  5.1 统计分析  14
  5.2 实验结果  14-19
6 讨论  19-26
  6.1 关于RF/6A的体外培养、鉴定及细胞生长曲线  19-21
  6.2 眼底新生血管性疾病的中医药治疗  21-22
  6.3 关于中药水蛭  22-26
    6.3.1 中药水蛭的药理作用  22-24
    6.3.2 中药水蛭的毒性与浓度选择  24-26
7 结论  26
8 问题与展望  26-27
致谢  27-28
参考文献  28-33
综述  33-49
附件1  49-50

水蛭提取液对RF/6A细胞生长抑制的浓度筛选

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