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青蒿琥酯联合TRAIL对前列腺癌PC-3细胞系作用的实验研究

作　者: 黄晓飞
导　师: 袁丁；张长城
学　校: 三峡大学
专　业: 药理学
关键词: 青蒿琥酯 TRAIL 前列腺癌
分类号: R737.25
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

目的:联合使用青蒿琥酯(Artesunate,ART)和肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF Related Apoptosis Inducing Ligand,TRAIL),探讨两种药物联合使用对人前列腺癌PC-3细胞增殖、周期、凋亡及细胞培养液上清中前列腺特异性抗原(Prostate specific antigen, PSA)浓度等方面的影响及可能机制,寻求对前列腺癌更为有效的治疗方法。方法: (1)根据文献资料和课题组前期研究基础,确定青蒿琥酯四个浓度和TRAIL三个浓度进行配对分组,另设单独使用青蒿琥酯组、单独使用TRAIL组和阴性对照组共15个组,药物处理对数生长期PC-3细胞48小时后,MTT法检测两种药物联合使用的增殖抑制率,进行统计学分析。(2)根据MTT结果,分别选取青蒿琥酯三个浓度和TRAIL两个浓度配对分组,另设阴性对照组共7组,药物处理48小时后流式细胞术进行细胞周期分析。(3)按以上分组,药物处理48小时后运用Annexin V-FITC/PI双染色法在流式细胞仪上检测细胞凋亡率。(4)按以上分组,药物处理48小时后,ELISA法检测PC-3细胞培养液上清中PSA的浓度。结果: (1)MTT结果显示,青蒿琥酯和TRAIL联合应用能够有效抑制前列腺癌PC-3细胞增殖,经过析因方差分析,增殖抑制率的差异与青蒿琥酯和TRAIL均有较好的剂量依赖关系。(2)流式细胞仪细胞周期分析结果显示,G2/M期细胞比例随两种药物浓度的增高而增高,差异有统计学意义,说明联合运用青蒿琥酯和TRAIL能够有效的将PC-3细胞阻滞在G2/M期,但药物处理后G0/G1和S期的细胞比例的变化缺乏统计学意义。(3) Annexin V-FITC/PI双染色法在流式细胞议上检测细胞凋亡率发现,联合用药能有效诱导PC-3细胞凋亡,凋亡率随着两种药物浓度的增高而增高,统计学分析与两种药物均呈良好的剂量依赖关系。(4)ELISA法检测PC-3细胞培养液上清中的PSA浓度发现,联合用药能有效降低培养液上清中的PSA浓度,PSA随着两种药物浓度的增高而降低,统计学分析与两种药物均呈良好的剂量依赖关系。结论:青蒿琥酯联合应用TRAIL,能够有效抑制人前列腺癌PC-3增殖,导致PC-3细胞G2/M期周期阻滞,有效诱导PC-3细胞凋亡,降低PC-3细胞培养液上清PSA等,且两种药物均呈良好的剂量依赖关系,联合用药作用强于单独用药,两者具有协同作用。中药青蒿琥酯联合应用TRAIL有望成为临床治疗前列腺癌新的治疗方案。

全文目录

内容摘要  4-5
Abstract  5-8
引言  8-11
1 青蒿琥酯联合TRAIL对前列腺癌PC-3细胞增殖的影响  11-19
  1.1 材料与方法  11-14
  1.2 结果与分析  14-17
  1.3 讨论  17-19
2 青蒿琥酯联合TRAIL 对前列腺癌PC-3 细胞周期的影响  19-24
  2.1 材料与方法  19-20
  2.2 结果与分析  20-22
  2.3 讨论  22-24
3 青蒿琥酯联合TRAIL 对前列腺癌PC-3 细胞凋亡的影响  24-29
  3.1 材料与方法  24-25
  3.2 结果与分析  25-27
  3.3 讨论  27-29
4 青蒿琥酯联合TRAIL 对前列腺癌PC-3 细胞PSA 的影响  29-33
  4.1 材料与方法  29-30
  4.2 结果与分析  30-31
  4.3 讨论  31-33
5 讨论与小结  33-34
6 进一步研究工作计划及展望  34-35
参考文献  35-39
综述  39-45
后记  45-46
附录:攻读硕士学位期间发表的部分学术论著  46

青蒿琥酯联合TRAIL对前列腺癌PC-3细胞系作用的实验研究

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