学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

脑缺血诱导的内质网应激和stresslin的表达

作　者: 梁燕
导　师: 沈玉先
学　校: 安徽医科大学
专　业: 药理学
关键词: 内质网应激 stresslin 脑缺血再灌注 CHOP 胶质激活 原代神经元培养
分类号: R743
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 152次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的观察脑缺血诱导的ER应激对stresslin表达的影响,并确定表达stresslin的神经细胞类型。方法采用大脑中动脉阻塞法(Middle Cerebral Artery Occlusion ,MCAO)建立大鼠脑缺血再灌注模型;采用HE染色,免疫组织化学,免疫荧光双标法研究正常大鼠脑中stresslin表达与分布。原代培养胎鼠神经元,用Tunicamycin诱导内质网应激,并用细胞免疫化学法观察stresslin表达与内质网应激的关系。表达和纯化人重组tau蛋白,观察tau是否能诱导原代培养的神经元表达stresslin。结果1.正常大鼠脑中stresslin的表达及分布正常大鼠脑中,stresslin在多个脑区如皮层、海马、丘脑、下丘脑、黑质、杏仁核均有少量表达,主要定位于胞浆。比较8只灌注大鼠和8只非灌注大鼠stresslin的表达与分布,发现取材过程对stresslin表达与分布无明显影响。比较8只雌鼠和8只雄鼠stresslin的表达与分布,发现性别对stresslin表达与分布无明显影响。比较8只普通级和8只SPF级大鼠stresslin表达与分布,发现普通级大鼠stresslin表达要比SPF级大鼠表达的多,但差异无显著性。2.脑缺血再灌注诱导的stresslin表达及分布在单侧MCAO模型上,缺血0.5 h再灌注1 h即出现同侧海马stresslin表达的增多;缺血2 h再灌注2 h,下丘脑区细胞及下连合器室管膜细胞中stresslin的表达呈强阳性;在缺血4h再灌注分别为12 h、24 h、36 h、48 h、72 h模型上,stresslin在皮层、海马、丘脑、下丘脑、黑质、杏仁核等脑区的表达都明显上调。随着缺血/再灌注时间的延长,stresslin表达量呈增加趋势。3. stresslin表达的细胞类型分别用神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞、小胶质细胞特异性抗体与stresslin抗体进行免疫荧光双标染色,发现stresslin表达的细胞类型较广泛,不仅在神经元中大量表达,在上述三种胶质细胞也有表达。另外,在下连合器室管膜细胞中表达明显。4.脑缺血再灌注诱导的内质网应激在大鼠脑缺血再灌注模型上,发现脑缺血部位神经细胞中内质网应激标志性蛋白质CHOP表达量增多,提示脑缺血再灌注诱导了神经细胞发生内质网应激。在该研究中,除了观察到已报道的CHOP细胞内分布形式外,我们还发现在非正常状态下,CHOP可以有胞浆分布。且在某些情况下,stresslin和CHOP二者有很好的共定位。同时还发现,CHOP对缺血的敏感性不及stresslin。5. NeuN与stresslin表达之间的关系NeuN是标志神经元核的特异性蛋白,在大鼠脑缺血再灌注模型上,NeuN阳性的神经元数量较正常大鼠明显减少。而在stresslin表达明显的神经元内,NeuN的表达量降低或阴性,提示stresslin和NeuN的表达呈负相关。6.脑缺血再灌注诱导了胶质细胞的激活在大鼠脑缺血再灌注模型上,海马、丘脑、下丘脑等多个脑区出现胶质细胞的激活,包括小胶质细胞的浸润、聚集和CD68的诱导表达以及胶质细胞特异性抗体GFAP的表达明显增多等,提示脑缺血再灌注诱导了胶质细胞的激活。7.内质网应激诱导原代培养神经元细胞stresslin的表达在原代培养的神经元中,未见stresslin表达。当用Tunicamycin诱导细胞内质网应激,发现细胞胞浆内stresslin的表达增多,同时伴有CHOP的表达。用重组的人tau蛋白处理原代培养的神经元,也可导致细胞胞浆内stresslin的表达增多和CHOP表达的增多。提示内质网应激刺激诱导原代培养的神经元表达stresslin。结论(1)脑缺血再灌注诱导了内质网应激及stresslin表达,大鼠脑中多种神经细胞均可表达stresslin,包括神经元、胶质细胞、少突胶质细胞、小胶质细胞及室管膜细胞。(2) CHOP在脑缺血再灌注诱导的内质网应激中有多种表现形式。(3)重组的人tau蛋白可诱导神经元内质网应激及stresslin表达。

全文目录


英文缩略词表  5-7
中文摘要  7-10
ABSTRACT  10-12
脑缺血诱导的内质网应激和stressIin 的表达  12-59
  1 前言  12-13
  2 实验材料  13-17
  3 方法  17-23
  4 结果  23-49
    4.1 正常大鼠脑中stresslin 的表达与分布  23-27
    4.2 脑缺血再灌注诱导的stresslin 表达特点  27-34
    4.3 表达stresslin 的神经细胞类型  34-39
    4.4 脑缺血再灌注诱导CHOP 的表达  39
    4.5 stresslin 和CHOP 的共表达  39
    4.6 脑缺血对 NeuN 表达的影响  39-43
    4.7 脑缺血再灌注诱导的胶质细胞激活  43-46
    4.8 stresslin 在原代培养的神经元中的表达  46-49
  5 讨论  49-54
  6 小结  54
  7 本研究的创新点  54-55
  参考文献  55-59
附录  59-61
致谢  61-62
综述  62-75
  参考文献  69-75

相似论文

  1. 急性肝衰竭小鼠肝组织内质网应激反应及Cyclin D1、HGF受体c-met表达和意义,R575.3
  2. 内质网应激预处理提高肾组织对缺血再灌注损伤耐受性的作用及机制,R692.5
  3. 全脑缺血再灌注大鼠海马CA1区Ngb与Caspase-3的相关性研究,R741
  4. bFGF对鼠脑缺血/再灌注皮质区p-Akt（Ser473）、Fractalkine表达的影响,R743.3
  5. 丁苯酞预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用,R743.33
  6. 外源性PCr抗动物脑缺血再灌注损伤及脑源性MODS实验研究,R965
  7. 丹星通络汤对大鼠脑缺血再灌注损伤TNF-α、NF-κB表达的影响,R285.5
  8. 表没食子儿茶素没食子酸酯减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的机制,R285.5
  9. GSK3β在CGNs内质网应激反应中的作用研究,R363
  10. 衣霉素预处理对脓毒症乳鼠心肌细胞活性及线粒体功能的影响,R459.7
  11. 甘露醇对小鼠脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响,R741
  12. 内质网应激预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元的保护作用研究,R743.3
  13. 氧化应激与内质网应激在高糖诱导乳鼠心肌细胞凋亡中的作用,R587.2
  14. 内质网分子伴侣PDI在非酒精性脂肪性肝病中的作用及机制研究,R575.5
  15. 二苯乙烯苷对老龄大鼠脑缺血再灌注损伤后HIF-1α及EPO蛋白表达的影响,R285.5
  16. 吡格列酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及IL-6含量的影响,R965
  17. 衣霉素诱导内质网应激介导的胃癌BGC823细胞凋亡,R735.2
  18. 甲酯化脂氧素A_4对大鼠局灶性脑缺血再灌注后血脑屏障的影响,R743.3
  19. 小檗碱对胰岛素抵抗大鼠内质网应激的影响,R285.5
  20. 羟基喜树碱诱导口腔鳞癌细胞内质网应激反应性凋亡的实验研究,R739.8
  21. 泛素—蛋白酶体抑制剂诱导头颈部鳞癌细胞凋亡的实验研究,R739.91

中图分类: > 医药、卫生 > 神经病学与精神病学 > 神经病学 > 脑血管疾病
© 2012 www.xueweilunwen.com