学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

甘露醇对小鼠脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

作　者: 张泺
导　师: 赵嘉训
学　校: 山西医科大学
专　业: 麻醉学
关键词: 甘露醇脑缺血再灌注损伤海马CA1区
分类号: R741
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 34次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的：进一步验证昆明小鼠脑缺血再灌注损伤实验动物模型的实用性,观察小鼠脑缺血再灌注损伤后不同时间点给予甘露醇干预的效果,验证关于脑缺血再灌注损伤后甘露醇干预最佳时机的研究结果。方法：健康昆明小鼠36只,雌雄不分,体重30±5g,随机分为6组,各组6只。A组：假手术组、B组：缺血再灌注损伤组(对照组)、C组：再灌注后即刻甘露醇干预组、D组：再灌注后30min甘露醇干预组、E组：再灌注后1h甘露醇干预组、F组：再灌注后1.5h甘露醇干预组。甘露醇干预组均按1g/kg剂量于尾静脉注射给予20%甘露醇注射液。采用前期报道的昆明小鼠双侧颈总动脉结扎脑缺血再灌注损伤模型,各组再灌注24h后快速开颅取脑。标本置于4%多聚甲醛液中固定24h后,取视交叉后的脑组织,常规石蜡包埋,冠状切片,片厚5μm,根据需要处理脑组织标本。部分进行苏木精-伊红染色(HE染色),以进一步验证师兄郭文义前期完成的实验成果,分别观察再灌注损伤后不同时间甘露醇干预对海马CA1区神经元存活细胞数、变性细胞率、组织形态学以及小鼠行为学改变的影响。另一部分进行末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原指数位切口末端标记TUNEL)技术检测,观察对神经细胞凋亡的影响。结果：HE染色观察：假手术组海马CA1区4层组织结构完整,层次分明。5层锥体细胞清晰可见、排列紧密,胞质均质红染,核大而圆,核膜完整,核仁清晰。细胞层向心侧间质呈典型的纤维束样结构,排列整齐。缺血再灌注损伤组4层组织结构变致密、间质明显水肿。甚至仅可见2-3层锥体细胞,正常锥体细胞数明显也减少,可见大量的变性坏死细胞,细胞肿胀,胞浆内有空泡形成,胞质嗜酸性增强,坏死细胞核呈梭形或三角形固缩,深染成蓝紫色。细胞间质水肿明显,呈团块状。细胞层向心侧间质纤维束样结构排列散乱、中断不规则。C组小鼠海马CA1区存活细胞数明显高于B组(p<0.05),变性细胞率明显低于缺血再灌注对照组(p<0.05),而与A组无显著差别(p>0.05),D、E、F组与B组比较均无显著差别(p>0.05)。TUNEL染色观察：形态学与HE染色一致,假手术组切片偶见阳性细胞(正常细胞也有凋亡现象)。缺血再灌注损伤组切片中可见大很多大小不一、形态各异的棕黄色阳性细胞(凋亡细胞增多)。C组小鼠海马CA1区细胞凋亡指数(AI)明显低于B组(p<0.05),与A组比较无显著差异(p>0.05),D、E、F组小鼠海马CA1区均可见较多阳性细胞,随着时间的变化细胞凋亡逐渐增多,F组与B组比较无显著差别(p>0.05)。结论：从形态学的角度观察,甘露醇早期干预能明显减轻脑缺血再灌注损伤,恢复灌注后30分钟给予甘露醇干预时,缺血神经组织细胞水肿已经形成,多种细胞损害机制均已启动,表现为变形细胞增多、凋亡细胞也增多,再给予甘露醇予救治基本无效。本实验观察结果再次提示临床心跳骤停抢救中,在自主心跳恢复的同时即应开始甘露醇脱水治疗。

全文目录

摘要  5-7
Abstract  7-9
前言  9-10
第一章材料和方法  10-15
  1.1 主要仪器和试剂  10
  1.2 实验分组和方法  10-13
  1.3 指标检测方法  13-14
  1.4 统计学分析  14-15
第二章结果  15-17
  2.1 各组行为学改变  15
  2.2 细胞组织形态  15
  2.3 存活细胞数  15
  2.4 变性细胞率  15
  2.5 神经细胞凋亡指数  15-17
讨论  17-19
结论  19-20
附图  20-24
参考文献  24-26
综述  26-34
  参考文献  31-34
个人简历  34-35
致谢  35

甘露醇对小鼠脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

内容摘要

全文目录

相似论文