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W~（3Bao）白斑小鼠的部分生物学特性及其突变基因的序列鉴定

作　者: 尹媛
导　师: 薛整风
学　校: 扬州大学
专　业: 动物学
关键词: W-3Bao Kit基因白斑小鼠
分类号: Q78
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 31次
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内容摘要

ENU（乙酰基亚硝基脲）诱变是近年来发展起来的研究功能基因的新手段,在获得功能基因研究材料的同时,又可以获得人类遗传性疾病的新模型。在此前的研究中,本课题组通过ENU诱变手段获得6种白斑突变小鼠,其中一种被命名为W^-3Bao,其突变基因被初步定位在第5号染色体上微卫星D5Mit356与D5Mit308之间,并将Kit基因列为其候选基因。本研究对W^-3Bao白斑小鼠包括生长繁殖、胚胎致死及血液学等方面的生物学特性进行资料收集和统计,以期建立相应的人类疾病动物学模型。研究结果表明,W^-3Bao杂合子突变小鼠繁殖能力正常,血液学指标测定亦未显示显著差异,但突变纯合子小鼠于胚胎期16日龄左右死亡,参考MGI中收录的Kit基因突变小鼠表型研究报道,推测可能由于纯合子胚胎严重贫血引起。在初步定位的基础上,本研究通过扩大F2代小鼠数量对W^-3Bao白斑小鼠突变基因进行了精确定位,最终将W^-3Bao突变基因定位于5号染色体D5Mit356和D5Mit308之间,距着丝粒约42.16cM处,在对该范围内已发现的基因逐一分析中确定Kit基因为W^-3Bao突变强力的候选基因。在精确定位基础上进一步通过RT-PCR技术从W^-3Bao杂合子小鼠和正常B6小鼠脑组织总RNA中扩增出Kit基因片段,测序后对结果进行分析,找出mRNA上的突变位点,随后PCR扩增Kit基因组对应部位进一步测序验证。结果发现W^-3Bao杂合子小鼠Kit基因编码区第441位碱基由T颠换为A,使得其第147位密码子由UAU变为终止密码子UAA,导致蛋白编码提前终止,从而引起白斑表型的出现。本研究通过对W^-3Bao白斑突变小鼠部分生物学特性方面的数据统计研究以及突变基因序列的成功鉴定,加深了对该突变小鼠的认识并为Kit基因的深入研究提供了一种新的材料,同时也为人类斑驳病动物模型的建立奠定了基础。

全文目录

中文摘要  3-5
Abstract  5-8
符号说明  8-9
文献综述  9-19
  一、基因功能的研究方法与ENU 诱变  9-13
  二、Kit 基因研究背景  13-19
研究内容  19-41
  第一部分:W~(-3Bao)白斑小鼠部分生物学特性研究  19-27
    1、实验材料  19-20
    2、实验方法  20-21
    3、结果  21-23
    4、讨论  23-27
  第二部分: W~(-3Bao)白斑杂合子小鼠 Kit 基因的序列分析  27-41
    1、实验材料  27-28
    2、实验方法  28-31
    3、结果  31-37
    4、讨论  37-41
参考文献  41-45
致谢  45-46
攻读学位期间发表的学术论文目录  46-47

W~（3Bao）白斑小鼠的部分生物学特性及其突变基因的序列鉴定

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