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VEGF和COX-2在恶性血液病中的表达及意义

作　者: 李琳
导　师: 任金海
学　校: 河北医科大学
专　业: 内科学
关键词: VEGF COX-2 恶性血液病 实时定量PCR 流式细胞术
分类号: R733
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要


目的:血管新生与恶性血液病的发生发展有密切的关系。VEGF和COX-2是血管新生的重要因子,也与恶性血液病发生发展密切相关。本研究重点探讨VEGF和COX-2 mRNA在恶性血液病患者中表达的相关性以及COX-2抑制剂对VEGF和COX-2蛋白表达水平的影响。方法:采集96例成人恶性血液病患者和20例正常对照的骨髓及外周血单个核细胞,应用实时定量PCR方法检测VEGF、COX-2的mRNA水平,并按疾病类型分组分析其临床意义。应用流式细胞术(FCM)检测不同浓度COX-2抑制剂干预U937细胞株前后不同时间点VEGF和COX-2蛋白的表达水平。结果:1.各组中VEGF mRNA表达的情况VEGF在急性白血病(AL)中的表达:AL患者VEGF mRNA表达水平为0.67±0.23,高于正常表达水平0.12±0.21,差异有统计学意义(P<0.05);其中初治急性髓系白血病(AML)患者VEGF表达水平为0.77±0.27,与正常对照比较,差异有统计学意义(P<0.05),M2、M4和M5组表达水平分别为0.68±0.16、0.79±0.32和0.75±0.25,M3表达水平为0.76±0.21。ALL患者VEGF表达水平为0.22±0.61,与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。复发组AL患者VEGF表达水平为0.71±0.25,与正常对照比较,差异有统计学意义(P<0.05),缓解组AL患者VEGF表达水平为0.22±0.63,与正常对照比较,差异无统计学意义(P>0.05),初治组AL与复发组AL无统计学差异(P>0.05)。38例初治AL患者经治疗后缓解率为81.6%(31/38)。按照VEGF mRNA平均表达水平0.67±0.23将38例初治AL患者分为两组。VEGF mRNA低于平均表达水平的初治AL患者缓解率为95.4%(21/22);VEGF mRNA高于平均表达水平的初治AL患者缓解率为43.7%(7/16)。两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。按照COX-2 mRNA平均表达水平0.72±0.61将38例初治AL患者分为两组。COX-2 mRNA低于平均表达水平的初治AL患者缓解率为92%(23/25);COX-2 mRNA高于平均表达水平的初治AL患者缓解率为41.7%(5/12)。两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。共同表达VEGF mRNA和COX-2 mRNA的初治AL患者缓解率为26.3%(5/19)。VEGF mRNA在多发性骨髓瘤中表达情况:初治多发性骨髓瘤(MM)患者VEGF mRNA表达水平为0.84±0.11,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。缓解MM患者VEGF表达水平为0.77±0.09,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。初治组与缓解组相比较无统计学差异(P>0.05)。VEGF mRNA在高危骨髓增生异常综和征(MDS)中表达情况:高危MDS患者VEGF表达水平为0.49±0.54,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。高危MDS患者与初治AL比较,差异无统计学意义(P>0.05)。VEGF mRNA在各期慢性粒细胞白血病(CML)中表达情况:慢性期CML患者VEGF表达水平为0.43±0.42,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).急变期患者VEGF表达水平为0.66±0.31,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。慢性期CML患者与急变期CML患者比较,有统计学差异(P<0.05)。急变期CML患者与初治AL比较,差异无统计学意义(P>0.05)2.各组中COX-2 mRNA表达的情况AL患者COX-2 mRNA表达水平为0.72±0.61,高于正常表达水平0.24±0.34,差异有统计学意义(P<0.05);其中初治AML患者COX-2表达水平为0.77±0.37,与正常对照比较,差异有统计学意义(P<0.05),M4和M5组表达水平分别为0.80±0.22和0.74±0.62,M2和M3组表达水平分别为0.72±0.45和0.79±0.32。ALL患者COX-2表达水平为0.68±0.41,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。复发组AL患者COX-2表达水平为0.76±0.59,与正常对照比较,差异有统计学意义(P<0.05),缓解组AL患者COX-2表达水平为0.31±0.24,与正常对照比较,差异无统计学意义(P>0.05),初治组AL与复发组AL比较有统计学差异(P<0.05)。COX-2 mRNA在MM中表达情况:初治MM患者COX-2表达水平为0.67±0.72,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);缓解MM患者COX-2表达水平为0.45±0.32,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。COX-2 mRNA在高危MDS中表达情况:高危MDS患者COX-2表达水平为0.73±0.52,与正常对照组比较,差异无统计学意义(P<0.05)。高危MDS患者COX-2 mRNA与初治AL比较,差异无统计学意义(P>0.05)。慢性期CML患者COX-2表达水平为0.55±0.57,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。急变患者COX-2表达水平为0.81±0.12,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。慢性期CML患者与急变期CML患者比较,有统计学意义(P<0.05)。急变期CML患者与初治AL比较,差异无统计学意义(P>0.05)3.各组中VEGF和COX-2 mRNA表达的相关性AL组中有10例M3,其中9例表达VEGF、7例表达COX-2,在共同表达两基因的6例中,VEGF mRNA表达与COX-2 mRNA表达呈正相关。M4 7例,其中6例表达VEGF、6例表达COX-2,在共同表达两基因的6例中,VEGF mRNA的表达与COX-2 mRNA表达呈正相关。M5 5例,其中5例表达VEGF、5例表达COX-2,在共同表达两基因的4例中,VEGF mRNA的表达与COX-2 mRNA表达呈正相关。8例MM患者中,5例表达VEGF,7例表达COX-2,在共同表达两基因的3例中,VEGF mRNA的表达与COX-2 mRNA表达无相关性。8例高危MDS患者中,7例表达VEGF、3例表达COX-2,在共同表达两基因的3例中,VEGF mRNA的表达与COX-2 mRNA表达无相关性。10例慢性期CML中9例表达VEGF、5例表达COX-2,在共同表达两基因的5例中,VEGF mRNA的表达与COX-2 mRNA表达呈正相关。4.应用COX-2抑制剂III对U937细胞株进行干预的结果空白组COX-2的表达率为99.2±0.5%。给药6小时后,5umol/l组COX-2的表达率为94.7±7.22% ; 10umol/l组COX-2的表达率为81.5±7.13% ; 50umol/l组COX-2的表达率为71.7±6.28%。与空白对照组相比, 10umol/l组以及50umol/l组COX-2表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。空白组VEGF表达率为99.6±0.4%; 5umol/l组VEGF表达率为97.5±5.2% ; 10umol/l组VEGF的表达率为96.7±2.47%; 50umol/l组VEGF的表达率为83.5±7.23%。与空白对照组相比, 50umol/l组VEGF表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。给药12小时后, 5umol/l组COX-2的表达率为89.4±5.22% ; 10umol/l组COX-2的表达率为74.7±2.55% ; 50umol/l组COX-2的表达率为67.8±5.32%。与空白对照组相比, 5umol/l组、10umol/l组以及50umol/l组COX-2表达下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。5umol/l组VEGF表达率为92.4±4.51% ; 10umol/l组VEGF表达率为80.2±3.82% ; 50umol/l组VEGF表达率为66.7±1.91%。与空白对照组相比, 10umol/l和50umol/l组VEGF表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。给药24小时后, 5umol/l组COX-2表达率为77.5±2.85%; 10umol/l组COX-2表达率为58.4±7.25% ; 50umol/l组COX-2表达率为43.5±2.38%。与空白对照组相比, 5umol/l组、10umol/l组以及50umol/l组COX-2表达下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。5umol/l组VEGF表达率为90.2±6.87%; 10umol/l组VEGF表达率为72.9±5.81% ; 50umol/l组VEGF表达率为54.32±2.09%。与空白对照组相比, 10umol/l和50umol/l组VEGF表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:VEGF和COX-2在AL、MM、高危MDS及各期CML中均有表达,是影响疾病预后的独立指标。在AL和CML中VEGF基因和COX-2基因的表达成正相关。COX-2抑制剂III对COX-2蛋白和VEGF蛋白的抑制作用呈时间剂量依赖性。

全文目录


中文摘要  4-10
英文摘要  10-16
研究论文 VEGF 和COX-2 在恶性血液病中的表达及意义  16-50
  第一部分 VEGF 和COX-2 在恶性血液病中的表达及意义  16-35
    前言  16-17
    材料与方法  17-20
    结果  20-25
    附图、附表  25-28
    讨论  28-33
    参考文献  33-35
  第二部分 COX-2抑制剂对COX-2及VEGF蛋白表达水平的影响  35-50
    前言  35-36
    材料与方法  36-38
    结果  38-41
    附图、附表  41-46
    讨论  46-48
    参考文献  48-50
综述  50-64
致谢  64-65
个人简历  65

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤
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