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女性SLE患者雌激素受体α基因多态性与Th1/Th2细胞因子漂移的相关性研究

作　者: 王子娥
导　师: 车至香
学　校: 山东大学
专　业: 临床检验诊断学
关键词: 系统性红斑狼疮 Th细胞细胞因子雌激素受体α
分类号: R593.241
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 39次
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内容摘要

一、目的通过对女性SLE患者进行ERα基因多态性,Th1/Th2细胞因子mRNA的检测,以及对它们之间相关性的研究,进一步探讨女性SLE患者的发病机制,为SLE的预防和治疗提供新的思路。二、方法提取SLE患者基因组DNA,PCR扩增ERa基因片段,分别取PCR扩增产物用XbaⅠ和PvuⅡ酶切、电泳,紫外检测仪观察结果,XbaⅠ酶切后可分为3种基因型:缺乏XbaⅠ酶切位点为XX型,杂合子为Xx型,存在XbaⅠ酶切位点为xx型:PvuⅡ酶切后可分为3种基因型:缺乏PvuⅡ酶切位点为PP型,杂合子为Pp型,存在PvuⅡ酶切位点为pp型。用淋巴细胞分层液密度梯度离心法常规分离外周血单个核细胞(PBMC)。TRIZOL法提取细胞总RNA,cDNA合成按照逆转录酶(promege产品)说明书操作合成。应用Primer3软件在线设计引物,以β-actin为内参照,RT-PCR扩增IL-10、IL-4和IFN-γ、IL-2 mRNA。通过琼脂糖凝胶电泳后,用TANON凝胶扫描仪,以Tanon Gis软件对电泳条带进行灰度扫描,并计算各细胞因子与β-actin的比值,从而得出各细胞因子mRNA的相对含量,并利用统计学方法得出ERα基因多态性与各细胞因子mRNA的关系。三、结果1.SLE患者与健康对照组ERα基因XbaⅠ和PvuⅡ酶切位点多态性之间差异无统计学意义;2.PpXx基因SLE患者IL-10和IL-4的表达比健康对照组升高(P＜0.01),在SLE患者组各基因型之间,PpXx基因型IL-10表达比PPXX、PPXx、Ppxx和ppxx基因型明显升高(P＜0.01),在PpXx基因型IL-4的表达比PPXX、Ppxx和ppxx基因型表达升高(P＜0.05);3.Ppxk基因型SLE患者IFN-γ、IL-2表达比健康对照组降低(P＜0.01),在SLE患者组各基因型之间,Ppxx基因型IFN-γ的表达比PpXx和ppxx明显降低(P＜0.05,P＜0.01),Ppxx基因型IL-2比PPXX、PpXx和ppxx基因型表达降低(P＜0.05);4.在健康对照组各基因型之间,IL-10、IL-4、IFN-γ和IL-2细胞因子表达差异均无统计学意义。四、结论1.证实了女性SLE患者中ERα基因PvuⅡ和XbaⅠ酶切位点多态性的基因分布与其在正常女性中的分布较为接近,女性SLE患者主要存在Th2优势。2.首次发现ERα基因PvuⅡ和XbaⅠ酶切位点多态性与细胞因子mRNA的表达有显著相关性,提示ERα的不同基因型有可能在一定程度上作为基因背景影响体内细胞因子的表达。

全文目录

中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
主要符号表  10-11
前言  11-13
材料  13-16
方法  16-28
结果  28-34
讨论  34-40
结论  40-41
参考文献  41-44
综述  44-52
致谢  52-53
攻读学位期间的研究成果  53-54
学位论文评阅及答辩情况表  54-55
外文文章  55-61

女性SLE患者雌激素受体α基因多态性与Th1/Th2细胞因子漂移的相关性研究

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