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皮肤感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性研究及耐药基因的检测

作　者: 姚岚
导　师: 惠艳
学　校: 新疆医科大学
专　业: 皮肤病与性病学
关键词: 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 聚合酶链反应 mecA/pvl基因 基因型 耐药基因
分类号: R446.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 28次
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内容摘要


目的：(1)了解皮肤感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)的感染及耐药情况；(2)检测表型耐药鉴定出的MRSA中mecA、PVL基因的表达情况；(3)检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因型及耐药基因。方法：收集2010年1月-8月新疆医科大学第一附属医院皮肤科门诊就诊的242例皮肤和软组织感染患者,(1)应用K-B纸片扩散法分离MRSA,并检测MRSA对9种抗菌药物的耐药性；(2)应用聚合酶链反应方法(Polymerase- Chain Reaction, PCR)对表型耐药检测出的MRSA进行necA基因检测,(3)应用PCR法进行SCCmec基因型和耐药基因的检测。结果：(1)MRSA的检出率为8.7%(21/242),；(2)应用K-B纸片法对9种抗生素的药敏试验结果为：青霉素100%、头孢唑林47.62%、红霉素42.86%、四环素38.09%、克林霉素33.33%、庆大霉素28.57%、氯霉素23.81%,环丙沙星19.05%、万古霉素0%；(3)应用PCR方法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA阳性21株,检出率为100%,PVL阳性12株,检出率为57.1%,本次实验中SCCmec型以Ⅳ型为主,占57.1%(12/21),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型检出率分别为4.8%(1/21)、9.5%(2/21),28.6%(6/21)。最常见的耐药基因是erm,检出率为49.8%(9/21),ant(4,,4”)未检出；aac(6,)/aph(2”)、aph(3,)-Ⅲ、tetM检出率分别为28.6%(6/21)、23.8%(5/21)、38.1%(8/21)。结论：(1)我院皮肤科门诊MRSA的检出率低于国内外其它地区的报道；(2)MRSA呈现多重耐药,尚未发现万古霉素耐药株；(3)我院皮肤科门诊患者皮肤感染MRSA中耐药基因的携带率较低。

全文目录


摘要  7-8
ABSTRACT  8-9
前言  9-12
研究内容与方法  12-22
  1. 材料  12-13
    1.1 研究对象  12
    1.2 主要实验试剂  12
    1.3 主要仪器设备  12-13
  2. 方法  13-15
    2.1 菌株采集和储存  13
    2.2 菌种鉴定  13
    2.3 Slidex Staph Plus乳胶凝集法快速检测金葡菌  13-14
    2.4 MRSA的检测  14
    2.5 药物敏感性试验  14-15
  3. PCR部分的材料及设备  15-18
    3.1 菌株来源  15
    3.2 实验仪器  15
    3.3 主要试剂及制备  15-16
    3.4 质控菌株  16
    3.5 引物  16-18
  4. PCR部分的实验方法  18-21
    4.1 DNA模板的制备  18-19
    4.2 PCR反应体系  19-20
    4.3 PCR反应条件  20
    4.4 琼脂糖凝胶电泳及结果判定  20-21
  5 统计分析  21-22
结果  22-27
  1 临床资料  22-23
  2 药敏实验结果  23-24
  3 PCR扩增mecA基因结果  24
  4 PCR扩增SCCmec基因型结果  24-25
  5 PCR扩增耐药基因结果  25-27
讨论  27-45
  1 临床资料  27-28
  2 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药总体情况  28-33
  3 医院获得性MRSA和社区获得性MRSA流行情况  33-34
  4 MRSA的治疗  34-38
  5 MRSA的预防  38
  6 MRSA的检测方法  38-39
  7 mecA基因检测意义  39-40
  8 PVL基因检测意义  40-41
  9 SCCmec基因分型情况  41-42
  10 MRSA耐药基因检出情况  42-45
小结  45-46
致谢  46-47
参考文献  47-58
综述  58-64
  参考文献  61-64
攻读硕士学位期间发表的学术论文  64-65
导师评阅表  65

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中图分类: > 医药、卫生 > 临床医学 > 诊断学 > 实验室诊断 > 微生物学检验
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