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人胆固醇酯水解酶在RAW 264.7巨噬细胞内瞬时表达对胆固醇代谢的影响

作　者: 冯旭
导　师: 罗俊生
学　校: 辽宁医学院
专　业: 外科学
关键词: 胆固醇酯水解酶氧化低密度脂蛋白泡沫细胞胆固醇代谢
分类号: R743.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的以RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞为研究对象,探讨人胆固醇酯水解酶(Human cholesteryl ester hydrolase,hCEH)在鼠巨噬细胞内瞬时表达,对细胞内胆固醇代谢产生的影响。方法利用FuGENE HD转染试剂将pEGFP-N1-hCEH质粒,转染RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞。24 h后将巨噬细胞与氧化型低密度脂蛋白(100mg/L),共同孵育48 h。荧光显微镜观察及Western Blot检测细胞内CEH的表达,油红O染色观察细胞内脂滴堆积情况,高效液相色谱检测细胞内游离胆固醇和胆固醇酯含量。结果转染72 h后,荧光细胞数最多,转染率接近40%。Western Blot检测显示,hCEH蛋白在鼠巨噬细胞内大量表达并部分抑制鼠CEH表达。转染hCEH组与ox-LDL诱导组相比,油红O染色阳性细胞数显著减少,细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量明显下降。结论hCEH基因在RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞内成功表达,减少细胞内胆固醇水平,抑制泡沫细胞的形成。

全文目录

一、摘要  4-7
  中文论著摘要  4-5
  英文论著摘要  5-7
二、英文缩略语  7-8
三、论文  8-24
  前言  8-9
  实验材料与方法  9-17
  结果  17-21
  讨论  21-23
  结论  23-24
四、本研究创新性的自我评价  24-26
五、参考文献  26-29
六、附录  29-42
  综述  29-39
    参考文献  35-39
  期间科研成绩  39-40
  致谢  40-41
  个人简介  41-42

人胆固醇酯水解酶在RAW 264.7巨噬细胞内瞬时表达对胆固醇代谢的影响

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