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ox-LDL对VSMC表达SDF-1α的影响及其对VSMC和SPC趋化作用的研究

作　者: 张鹏
导　师: 阮秋蓉
学　校: 华中科技大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 血管平滑肌细胞平滑肌祖细胞基质细胞衍生因子1a 氧化低密度脂蛋白小鼠动脉粥样硬化
分类号: R363
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的1、探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对小鼠血管平滑肌细胞表达基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)的影响;2、比较VSMC的条件培养液及SDF-1α对血管平滑肌细胞(VSMC)和平滑肌祖细胞(SPC)趋化迁移的影响。方法1、组织块贴壁法培养小鼠主动脉平滑肌细胞,用免疫组织化学方法对培养的平滑肌细胞进行鉴定;2、ox-LDL与VSMC共培养,用免疫组织化学方法、酶联免疫吸附试验(ELISA)测定VSMC表达SDF-1α蛋白的变化,用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定VSMC表达SDF-1αmRNA的变化,观察剂量-时间效应;3、趋化迁移实验:将含有趋化因子SDF-1α的培养液置于Transwell小室下室,将VSMC或SPC悬液置于其上室,共孵育6h后,乙醇固定,高倍镜下计数滤膜背面(下室面)的细胞数,检测VSMC的条件培养液及SDF-1α对VSMC和SPC的趋化迁移的影响。结果1、培养的小鼠血管平滑肌细胞的纯度可以达到约90%。2、小鼠血管平滑肌细胞有基础水平的SDF-1α的表达。ox-LDL的浓度在0～60ng/ml范围内,作用24h,SDF-1α蛋白的表达随ox-LDL浓度的增加而变化,SDF-1α蛋白表达的峰值在ox-LDL浓度为45ng/ml时,是ox-LDL浓度为0ng/ml时的1.4倍。在ox-LDL浓度为45ng/ml时,0～48h范围内,SDF-1α蛋白的表达变化随时间的延长而变化, SDF-1α蛋白表达的峰值在24h,是0h的1.5倍。在ox-LDL浓度为45ng/ml时,0～30h范围内,SDF-1αmRNA的表达变化随时间的延长而变化,SDF-1α基因mRNA的峰值在10h,是0h的3.2倍。3、VSMC的条件培养液及SDF-1α对VSMC和SPC都具有明显趋化作用。而且VSMC的条件培养液及SDF-1α对SPC的趋化作用强于对VSMC的趋化作用。结论1.、ox-LDL可增强小鼠血管平滑肌细胞SDF-1α的表达。2、VSMC的条件培养液及SDF-1α对SPC的趋化作用明显强于对VSMC的趋化作用。

全文目录

中英文缩略语对照表  5-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
前言  10-11
材料与方法  11-22
结果  22-29
讨论  29-30
结论  30-31
参考文献  31-33
综述 CXCR4~+干细胞与动脉粥样硬化的研究进展  33-41
  参考文献  38-41
致谢  41

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