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降钙素基因相关肽在寻常型银屑病患者中的表达及其意义研究

作　者: 姚明珠
导　师: 陈明亮
学　校: 中南大学
专　业: 皮肤病与性病学
关键词: 降钙素基因相关肽寻常型银屑病花生四烯酸乙醇胺 T淋巴细胞白介素-6
分类号: R758.63
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：检测降钙素基因相关肽(Calcitonin Gene-related Peptide, CGRP)在寻常型银屑病患者皮损及血浆中的表达水平了解CGRP与银屑病的关系。检测花生四烯酸乙醇胺(Anandamide, AEA)和神经生长因子(Nerve Growth Factor, NGF)在寻常型银屑病患者血浆中的表达水平,并用CGRP处理寻常型银屑病患者外周血T淋巴细胞,观察其对T淋巴细胞黏附和迁移能力及IL-6、IFN-γ表达的影响,初步探讨CGRP在寻常型银屑病发病过程中的作用机制及其意义。方法：1.免疫组织化学方法检测寻常型银屑病皮损及正常人皮肤组织中CGRP的蛋白表达情况,采用Motic Med 6.0数码医学图像分析系统中免疫组化自动分析程序检测各组样本阳性细胞的CGRP阳性目标积分光密度值来反映CGRP蛋白的相对表达量。2.放射免疫测定法检测寻常型银屑病患者及正常人血浆中CGRP的表达水平,同时记录寻常型银屑病患者的皮损面积和严重程度指数(Psoriasis Area and Severity Index, PASI),分析其与外周血中CGRP蛋白表达水平的相关性。3. ELISA法检测寻常型银屑病患者血浆中NGF的表达水平。4.液质联用法检测寻常型银屑病患者血浆中AEA的浓度。5.密度梯度离心法和CD3-磁珠分离寻常型银屑病患者外周血T淋巴细胞并培养,采用不同浓度CGRP处理T淋巴细胞,观察其黏附与迁移能力的改变,同时用ELISA法检测各处理组细胞上清液中IL-6、IFN-γ的蛋白表达水平。结果：1.寻常型银屑病患者组和健康对照组CGRP的免疫组化阳性表达积分光密度值分别为212.9±23.8和144.6±17.6,患者组皮损CGRP蛋白表达水平显著高于健康对照组(P<0.05)2.寻常型银屑病患者组和健康对照组的血浆CGRP水平分别为49.43±4.59pg/mL和34.97±4.41pg/mL,患者组血浆CGRP蛋白表达水平显著高于健康对照组；患者血浆中CGRP表达水平与PASI评分呈正相关。(均为P<0.05)。3.寻常型银屑病患者组和健康对照组血浆AEA水平分别0.15±0.01ng/mL和0.11±0.01ng/mL,寻常型银屑病患者组的血浆AEA表达水平显著高于健康对照组(P<0.05)。寻常型银屑病患者组的血浆NGF表达水平与健康对照组无明显差异。4. CGRP呈浓度依赖性促进寻常型银屑病外周血T淋巴细胞迁移及对基质黏附的能力,并促进T淋巴细胞分泌IL-6(均为P<0.01),但不影响IFN-γ的水平。结论：CGRP在寻常型银屑病患者整体与局部蛋白表达水平均高于正常健康人,其血浆含量与疾病严重程度呈正相关,它可能是银屑病发生发展的重要原因。CGRP在银屑病中的表达水平升高可能与AEA释放增加有关,其作用机理可能是通过促进T淋巴细胞的迁移、黏附及分泌IL-6的能力而实现的。

全文目录

摘要  4-7
ABSTRACT  7-11
缩略词表  11-12
第一章前言  12-14
第二章材料和方法  14-21
  1.1 研究对象  14
  1.2 主要试剂和仪器  14-16
  1.3 实验方法  16-20
  1.4 统计学分析  20-21
第三章结果  21-28
  2.1 CGRP蛋白在寻常型银屑病皮损和正常皮肤中的相对表达含量  21-22
  2.2 CGRP在寻常型银屑病患者和正常人血浆中的表达水平及患者组血浆CGRP表达水平与PASI评分的相关性分析  22-23
  2.3 AEA与NGF在寻常型银屑病患者和正常人血浆中的表达水平  23-25
  2.4 不同浓度CGRP对寻常型银屑病患者外周血T淋巴细胞基质粘附、迁移以及IL-6和IFN-γ分泌能力的影响  25-28
第四章讨论  28-31
结论  31-32
参考文献  32-35
综述  35-48
  参考文献  41-48
致谢  48-49
攻读学位期间主要的研究成果及获奖情况  49

降钙素基因相关肽在寻常型银屑病患者中的表达及其意义研究

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