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松木层孔菌菌丝体多糖的结构和活性研究

作　者: 蔡东玲
导　师: 张丽萍
学　校: 东北师范大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 松木层孔菌多糖结构免疫活性
分类号: Q946.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 102次
引　用: 2次
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内容摘要

松木层孔菌(Phellinus pini)经发酵培养得到菌丝体,发酵菌丝体经热水提取,醇沉得胞内粗多糖,粗多糖经冻融分级,酶和Sevag法联合脱蛋白,SepharoseCL-6B柱层析制备得精制多糖PPM,经SepharoseCL-6B柱层析、HPLC和比旋光度法验证,PPM分子量及极性为均一组分,可以进行结构分析。HPLC测得相对分子质量为22kDa,气相色谱(GC)分析表明其单糖组成为Man、Gal和Glc,是一种中性杂多糖。多糖PPM经红外光谱分析、部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化和核磁共振分析,结果表明其结构主体部分由1,2-Man组成,平均每2个残基上有1个分支,分支点为Man的6-O处,支链部分为1,3-Gal、1,6-Gal和1,4-Man,末端残基为Glc和Man。应用MTT方法体外检测PPM对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响,结果表明PPM对小鼠脾淋巴细胞的增殖有显著的促进作用,同时对ConA和LPS诱导的T、B淋巴细胞增殖反应具有明显的促进作用。

全文目录

中文摘要  4-5
英文摘要  5-8
引言  8-18
  1 真菌多糖的概述  8-11
    1.1 真菌多糖的种类  8-9
    1.2 真菌多糖的结构  9-10
    1.3 真菌多糖的构效关系  10-11
    1.4 真菌多糖的修饰  11
  2 真菌多糖的研究方法概述  11-16
    2.1 真菌多糖的提取和纯化  11-13
    2.2 真菌多糖的纯度检定及分子量测定  13-14
    2.3 真菌多糖的结构研究方法  14-16
  3 本课题研究的目的和意义  16-18
第一章结果与讨论  18-36
  1 实验材料  18
  2 松木层孔菌菌丝体多糖的提取与粗多糖的研究  18-19
  3 粗多糖的分级纯化及纯度鉴定  19-20
  4 精制多糖的性质研究  20
  5 精制多糖的结构研究  20-33
    5.1 部分酸水解  20-22
    5.2 高碘酸氧化和 Smith 降解  22-26
    5.3 甲基化分析  26-32
    5.4 ~(13)CNMR 核磁共振分析  32-33
  6 精制多糖的体外淋巴细胞转化实验  33-36
第二章实验方法  36-41
  1 松木层孔菌的发酵培养  36
  2 粗多糖的提取  36
  3 粗多糖的分级纯化及纯度鉴定  36-37
  4 精制多糖的性质研究  37-38
  5 精制多糖的结构研究  38-39
  6 精制多糖的淋巴细胞转化实验  39-41
第三章结论  41-42
参考文献  42-45
致谢  45

松木层孔菌菌丝体多糖的结构和活性研究

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